2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、本研究所選定的兩個候選基因豬磷酸葡萄糖變位酶1(PGM1)和豬尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2(UGP2)基因的功能是第一次在豬上進(jìn)行鑒定和檢驗。豬PGM1基因和豬UGP2基因的具體功能和表達(dá)分布在豬上都還沒有相關(guān)的研究報道。通過不同發(fā)育時期豬骨骼肌芯片的聚類分析,篩選獲得大量影響胴體和肉質(zhì)性狀的基因,其中包括豬PGM1基因和豬UGP2基因等。同時,豬PGM1基因在蛋白表達(dá)篩選中具有表現(xiàn)出顯著差異,并且豬UGP2基因所編碼蛋白是參與糖代謝的

2、一個的酶,豬PGM1基因和豬UGP2基因的功能研究,到目前為止還沒有詳細(xì)的報道。
  本文從發(fā)掘新的候選基因出發(fā),以期尋找到影響肉質(zhì)品質(zhì)的關(guān)鍵基因,改善肉質(zhì)品質(zhì)。本研究從大白豬和梅山豬中提取的核酸樣品,利用實時定量RT-PCR技術(shù)分析了豬PGM1基因和豬UGP2基因在豬肌肉組織中的表達(dá)分布,以及骨骼肌不同發(fā)育階段的分布規(guī)律,分離鑒定了兩個基因啟動子核心區(qū)域,初步掌握了其與肌肉形成發(fā)育之間的關(guān)系,其結(jié)果如下:
  1.利用生物

3、信息學(xué)方法,獲得豬PGM1基因mRNA序列2481 bp,預(yù)測其ORF長度為1689 bp,豬PGM1基因有外顯子11個,內(nèi)含子10個,內(nèi)含子剪切方式符合“GT-AG”法則。該基因編碼562個氨基酸,蛋白質(zhì)分子量約為62 KDa,等電點pI為6.07。該蛋白為典型的穩(wěn)定性蛋白,定位在胞質(zhì)膜上,為親水性蛋白。
  獲得豬UGP2基因mRNA序列2056 bp,預(yù)測其ORF長度為1527 bp,豬UGP2基因有外顯子10個,內(nèi)含子9個

4、,內(nèi)含子剪切方式符合“GT-AG”法則。該基因編碼508個氨基酸,蛋白質(zhì)分子量約為57 KDa,等電點pI為7.69。該蛋白為典型的穩(wěn)定性蛋白,定位在細(xì)胞外,為親水性蛋白。
  2.通過進(jìn)化樹分析,豬PGM1基因與豬UGP2基因與牛的親緣關(guān)系最近,其次是猩猩、人、恒河猴、穴兔等哺乳動物。兩個基因在進(jìn)化上有高度的保守性。
  3.克隆獲得豬PGM1基因和豬UGP2基因的基因組序列和其在5'端的啟動子序列,其中擴(kuò)增得到豬PGM1

5、基因2311 bp的啟動子序列和豬UGP2基因2077 bp的啟動子序列。分別以該基因轉(zhuǎn)錄起始位點(ATG)開始,利用5'端刪除啟動子序列的方法,將所擴(kuò)增得到啟動子序列分割為不同長度的缺失片段。
  豬PGM1基因的啟動子片段分割為6個缺失片段,其中在轉(zhuǎn)錄起始位點(ATG)上游1343 bp為活性最長片段;豬UGP2基因的啟動子片段分割為7個缺失片度,其中在在轉(zhuǎn)錄起始位點(ATG)上游588 bp為活性最高片段。
  4.通

6、過定量RT-PCR發(fā)現(xiàn),豬PGM1基因和豬UGP2基因在骨骼肌中均具有較高表達(dá)。同時兩個基因在肝臟中也具有較高的表達(dá),說明兩個基因與糖類合成代謝有著密切關(guān)系。
  5.利用定量RT-PCR方法,在不同肌纖維類型的骨骼肌中,豬PGM1基因在背最長肌和股二頭肌中表達(dá)量最高,而在咬肌、比目魚肌、腓最長肌、趾肌、半腱肌中表達(dá)較低,但相互之間無顯著性差異。
  豬UGP2基因在比目魚肌表達(dá)量最高,但與股二頭肌、咬肌、腓最長肌、趾肌、半

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