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文檔簡介
1、探討保加利亞乳酸桿菌(Lactobacillus bulgaricus,LBG)對(duì)幽門螺旋桿菌悉尼株(helicobacter pylori Sydney strain 1,HpSSl)或幽門螺旋桿菌悉尼株脂多糖(1ipopolysaccharide of helicobacter pylori Sydney strain1,HpSSl-LPS)作用下SGC-7901細(xì)胞的p38有絲分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activ
2、ated protein kinase,p38MAPK)磷酸化水平和凋亡率(apoptosis index,AI)的影響。 實(shí)驗(yàn)材料與方法:使用人胃癌細(xì)胞株SGC-7901,根據(jù)作用于細(xì)胞的不同干預(yù)措施,分組為:NC組(對(duì)照組)、Hp組(HpSSl干預(yù))、LPSl組、LPS2組及LPS3組(分別用2.5EU/ml、25EU/ml、250EU/ml的HpSSl-LPS干預(yù))、LBG-Hp組(LBG預(yù)處理1h后HpSSl干預(yù))、LB
3、G-LPSl組、LBG-LPS2組及LBG-LPS3組(LBG預(yù)處理1h后,分別用2.5EU/ml、25EU/ml、250EU/ml的HpSSl.LPS干預(yù))、SB-Hp組(p38MAPK通路阻滯劑SB203580預(yù)處理1h后HpSSl干預(yù))、SB-LPSl組、SB-LPS2組及SB-LPS3組(SB203580預(yù)處理1h后,分別用2.5EU/ml、25EU/ml、250EU/ml的HDSSl-LPS干預(yù))。用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測各組細(xì)
4、胞爬片中磷酸化p38MAPK的水平,用MTT法檢測各組的細(xì)胞活性,流式細(xì)胞儀檢測各組樣本的凋亡率及細(xì)胞周期。實(shí)驗(yàn)中,MTT法各組干預(yù)時(shí)間為4h、5h、6h,免疫細(xì)胞化學(xué)檢測為2h,流式細(xì)胞術(shù)檢測為6h。MTT法各組設(shè)置4孔,重復(fù)完成2次,免疫細(xì)胞化學(xué)各組均完成2次,流式細(xì)胞術(shù)各組均完成4次。 結(jié)果: 1.HpSSl或HpSSl-LPS都能夠時(shí)間依賴性地抑制SGC7901細(xì)胞的活性,在2.5EU/m1~250EU/ml濃度
5、范圍內(nèi),HpSSl-LPS對(duì)SGC7901細(xì)胞活性的抑制呈濃度依賴性;SB203580能對(duì)抗HpSS 1或HpSSl-LPS的這些作用。 2.HpSSl或HpSSl-LPS都能夠誘導(dǎo)SGC7901細(xì)胞凋亡,在2.5EU/m1~250EU/ml濃度范圍內(nèi),HpSSl-LPS對(duì)SGC7901細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用呈濃度依賴性;SB203580或LBG能對(duì)抗HpSSl或HpSSl-LPS的這一作用。 3.HpSSl或HpSSl-L
6、PS都能夠激活p38AMPK磷酸化途徑,在2.5EU/ml~250EU/ml濃度范圍內(nèi),HpSSl-LPS對(duì)p38MAPK磷酸化途徑的激活呈濃度依賴性;LBG能對(duì)抗HpSSl或HpSSl-LPS的這一作用。結(jié)論:HpSSl及HpSSl-LPS均可誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞發(fā)生凋亡,其機(jī)制可能包括對(duì)p38MAPK磷酸化途徑的激活,而LBG能對(duì)抗HpSSl及HpSSl-LPS的促凋亡作用,其機(jī)制可能包括阻斷了兩者對(duì)p38MAPK磷酸化途徑的激
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