水溶性綠茶多糖的系統(tǒng)分級(jí)純化及其免疫活性與清除羥自由基活性的研究.pdf

1、多糖因具有多種生物活性越來越引起人們的重視，為了篩選出高免疫活性和高清除羥自由基活性的多糖組分，將炒青綠茶經(jīng)水提取后，茶湯用0.2μm孔徑的膜過濾，濾液依次經(jīng)過150kD、20kD、6kD的膜組件進(jìn)行分級(jí)和濃縮。得到150kD、20kD、6kD三部分的截留液。同時(shí)對(duì)茶渣進(jìn)行堿提處理，以比較水提綠茶多糖與堿提綠茶多糖的各分級(jí)組分理化性質(zhì)及免疫活性等方面的差異。分別將150kD、20kD、6kD三部分的截留液和堿提多糖依次經(jīng)過DEAE-52

2、纖維素離子交換層析和丙烯葡聚糖凝膠SephacrylS-300柱層析系統(tǒng)分離、純化，HPGPC-ELSD鑒定各多糖組分的純度及分子量分布，并測(cè)定了各分級(jí)組分對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞系Raw264.7檢測(cè)免疫活性的影響以及清除羥自由基的活性。結(jié)果表明，茶湯中50％以上的干物質(zhì)能夠透過20KD的膜，對(duì)于多糖來說，則以20kD膜截留液中含量最高，其占干物質(zhì)的比重可達(dá)到36.86％，150kD膜和6kD膜截留部分中多糖含量分別為27.13％和21.16％

3、，而透過6kD膜部分中占干物的含量則僅為1.09％，由此可見，膜分離處理對(duì)于茶多糖的分離純化效果明顯。水溶性綠茶多糖經(jīng)過系統(tǒng)分級(jí)后共得到了20多個(gè)分級(jí)組分；HPGPC-ELSD鑒定各多糖組分的純度及分子量分布，結(jié)果表明得到7個(gè)均一水提多糖組分和兩個(gè)堿提多糖組分；用小鼠巨噬細(xì)胞系Raw264.7檢測(cè)免疫活性，發(fā)現(xiàn)對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞Raw264.7有顯著活性的多糖組分大多集中在20kD左右，有較強(qiáng)清除羥自由基的多糖組分大多集中在6kD左右，部分