成纖維激活蛋白α(+)胰腺星狀細胞促進胰腺癌細胞遷移和侵襲及機制研究.pdf

1、博士學位論文學校代碼： 1 0 0 2 3學 號：B 2 0 1 0 0 0 1 0 2 2成纖維激活蛋白Q ( + ) 胰腺星狀細胞促進胰腺癌細胞遷移和侵襲及機制研究所 院 ：姓 名 ：指導(dǎo)教師：學科專業(yè)：導(dǎo)師小組：研究方向：完成日期：北京協(xié)和醫(yī)院文張廖泉教授普通外科學胡亞副教授吳元德教授胰腺癌腫瘤微環(huán)境及腫瘤免疫2 0 1 3 年4 月中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院博士研究生學位論文中文摘要研究背景胰腺癌是一種進展迅速、死亡率高的惡性

2、腫瘤，其顯著的病理學特點是間質(zhì)成分較多，纖維增生反應(yīng)明顯。越來越多的研究證據(jù)表明，胰腺癌間質(zhì)在胰腺癌的發(fā)生和發(fā)展中扮演了重要的角色。目前胰腺癌綜合治療效果不佳，預(yù)后差，針對胰腺癌間質(zhì)的研究和治療策略，有可能提高胰腺癌的綜合治療效果，改善胰腺癌患者的預(yù)后。成纖維激活蛋白0 【( F A P 0 【) 作為絲氨酸蛋白酶家族的成員，在激活的間質(zhì)中表達，參與不同的生理和病理生理過程，如胚胎發(fā)育、傷口愈合、慢性炎癥和惡性腫瘤等。腫瘤間質(zhì)中表達F

3、A P a 的肌成纖維樣細胞可促進腫瘤細胞增殖和侵襲、影響腫瘤細胞凋亡、并與惡性腫瘤病人的不良預(yù)后密切相關(guān)。針對腫瘤間質(zhì)F A P a 新的腫瘤診療策略，吸引越來越多的研究者關(guān)注。胰腺癌間質(zhì)中肌成纖維樣細胞的主要來源為胰腺星狀細胞，然而針對表達F A P a 的胰腺星狀細胞在胰腺癌的進展過程中所發(fā)揮作用及其相關(guān)機制尚無研究報道。本研究探討F A P a ( + ) 胰腺星狀細胞在胰腺癌的進展過程中所扮演的角色以及與胰腺癌細胞相互作用的機

4、制。目的( 1 ) 研究胰腺癌間質(zhì)中F A P a 與胰腺癌臨床病理特點和胰腺癌患者的預(yù)后關(guān)系；( 2 ) 研究F A P 0 【( + ) 胰腺星狀細胞對胰腺癌細胞惡性表型的影響；( 3 ) 研究F A P a ( + ) 胰腺星狀細胞影響胰腺癌惡性表型的機制。方法( 1 ) 應(yīng)用免疫組織化學方法檢測胰腺癌組織切片中F A P a 的表達情況；分析F A P a與胰腺癌臨床病理特點和胰腺癌患者的預(yù)后關(guān)系；( 2 ) O u t - -

5、 g r o w t h 方法分離人原代胰腺星狀細胞：采用T G F [ 3 1 誘導(dǎo)胰腺星狀細胞表達F A P a ，獲得F A P a ( + ) 胰腺星狀細胞；C C K 8 檢測在體外F A P a ( + ) 和F A P a( 一) 胰腺星狀細胞對胰腺癌細胞增殖的影響；T r a n s w e l l 法檢測在體外F A P a ( + )和F A P a ( 一) 胰腺星狀細胞對胰腺癌細胞遷移和侵襲的影響；使用免疫缺陷裸

6、鼠的皮下移植瘤模型，在體內(nèi)檢測F A P a ( + ) 和F A P 0 【( 一) 胰腺星狀細胞對胰腺癌細胞增殖的影響；裸鼠脾臟注射的轉(zhuǎn)移瘤模型，在體內(nèi)檢測F A P c z ( + ) 和F A P c x ( 一)胰腺星狀細胞對胰腺癌細胞遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移的影響。( 3 ) 細胞因子芯片檢測F A P a ( + ) 和F A P a ( 一) 胰腺星狀細胞表達的差異細胞因子；酶聯(lián)免疫吸附測定法，驗證F A P a ( + ) 和