菊芋菊糖的提取純及其生物活性研究.pdf

1、本論文以菊芋為原料，討論了新鮮菊芋的預(yù)處理方法，本實(shí)驗(yàn)選擇60℃烘箱中熱風(fēng)烘干；分析了紅皮和白皮兩種菊芋的成分，優(yōu)化了菊芋菊糖的提取工藝，其中熱回流提?。禾崛r(shí)間為70min，提取溫度為70℃，料液比為1:30；超聲波提取：提取輸出功率112W，提取溫度70℃，提取時(shí)間20 min，料液比1:20；微波提?。禾崛r(shí)間為14min，料液比為1:20，提取功率為100W。
　　 優(yōu)化了菊糖純化工藝：提取得到得菊糖粗提液經(jīng)過(guò)石灰法、醇

2、沉和大孔樹(shù)脂S-8吸附除雜，真空冷凍干燥后得到純度較高菊糖，為白色粉末，用酶-HPLC聯(lián)用方法檢測(cè)菊糖純度為96.2％。
　　 建立高效液相色譜測(cè)定菊糖相對(duì)分子質(zhì)量方法，色譜條件為，流動(dòng)相：三蒸水；流速：0.8 mL/min；進(jìn)樣量：20μL；色譜柱：OHpak SB-804；柱溫：30℃。三種提取方法得到的菊糖相對(duì)分子量分別為：熱回流提取3500，超聲提取2405，微波提取3864，同時(shí)對(duì)新建立的方法進(jìn)行了精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定

3、性和準(zhǔn)確度的考察。
　　 優(yōu)化了海棗曲霉發(fā)酵產(chǎn)生內(nèi)切菊糖酶的培養(yǎng)條件，其培養(yǎng)基組成為：菊糖2％，磷酸二氫銨0.5％，磷酸二氫鉀0.25％，MgSO4·7H2O0.05％；發(fā)酵時(shí)間60h，發(fā)酵溫度28℃，初始pH值在6.0～7.0范圍內(nèi)，接種量為8％。按確定的最優(yōu)條件培養(yǎng)海棗曲霉，得到菊糖酶粗酶液，酶活為18.39U/mL，I/S值為45.71。
　　 優(yōu)化了菊糖酶酶解菊糖成低聚果糖的酶解條件：最適溫度60℃～70℃，酶解

4、時(shí)間12～16h，底物濃度為10％～20％，最適pH為6.0～7.0。菊糖酶解率最高可達(dá)59.3％；運(yùn)用超濾法得到菊糖酶解產(chǎn)物--低聚果糖，真空冷凍干燥后得到白色粉末，利用高效液相色譜法測(cè)定其分子量為509，聚合度約為2～3。
　　 長(zhǎng)雙歧桿菌在以菊糖和低聚果糖為碳源的培養(yǎng)基中的增殖情況均好于以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基，說(shuō)明菊糖和低聚果糖都可以作為長(zhǎng)雙歧桿菌的生長(zhǎng)因子，并且長(zhǎng)雙歧桿菌在分別以菊糖和葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基中形態(tài)無(wú)明顯差別