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文檔簡介
1、1、研究背景:
銀屑病病是皮膚科的常見病和多發(fā)病,且是中醫(yī)治療的優(yōu)勢病種之一。近幾年隨著空氣污染及社會壓力的增大,有發(fā)病率均有逐年提高的趨勢?!扒鍩峄钛舛緩头健弊鳛橐环N臨床有效療法,30多年來一直是我科臨床治療“血熱證”尋常型銀屑病所用,它可以有效促進性皮損的消退,延長緩解期,減少復發(fā)。由于中藥成分復雜,清熱活血解毒復方治療銀屑病的作用機制,前面我們雖然做了大量研究,但其作用機制至今仍不清楚。
2、研究目的:
2、> 以人永生化角質形成細胞HaCat細胞為研究對象,觀察清熱活血解毒復方和丹皮酚對人永生化角質形成細胞HaCat細胞的增殖、凋亡、及相關凋亡基因的影響,對炎癥因子的分泌及相關促炎基因的影響,以揭示探討清熱活血解毒復方治療銀屑病的機理,為臨床和科研提供思路和指導。
3、研究方法:
3.1采用CCK-8、流式細胞儀技術、RT-PCR及Western Blot技術方法觀察清熱活血解毒復方對Hacat細胞增殖、凋亡及凋亡基
3、因Bcl-xl、Bax表達的影響。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、RT-PCR及Western Blot技術方法觀察清熱活血解毒復方對Hacat上清中細胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8分泌及p38表達的影響。
3.2采用CCK-8、流式細胞儀技術、RT-PCR及Western Blot技術方法觀察清熱活血解毒復方對TNF-α誘導的Hacat細胞增殖、凋亡及凋亡基因Bcl-xl、Bax表達的影響。采
4、用聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、RT-PCR及Western Blot技術方法觀察清熱活血解毒復方對TNF-α誘導的Hacat上清中細胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8分泌及p38表達的影響。
3.3采用CCK-8、流式細胞儀技術、RT-PCR及Western Blot技術方法觀察丹皮酚對Hacat細胞增殖、凋亡及凋亡基因Bcl-xl、Bax表達的影響。采用聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、RT-PCR及W
5、estern Blot技術方法觀察丹皮酚對Hacat上清中細胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8分泌及p38表達的影響。
3.4采用CCK-8、流式細胞儀技術、RT-PCR及Western Blot技術方法觀察丹皮酚對TNF-α誘導的Hacat細胞增殖、凋亡及凋亡基因Bcl-xl、Bax表達的影響。采用聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、RT-PCR及Western Blot技術方法觀察丹皮酚對TNF-α誘導的
6、Hacat上清中細胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8分泌及p38表達的影響。
4.研究結果:
4.1結果顯示清熱活血解毒復方可以抑制HaCat細胞的增殖,促進HaCat細胞的凋亡,并可以上調Bax mRNA及蛋白的表達。
4.2結果顯示清熱活血解毒復方可以抑制TNF-α誘導的HaCat細胞的增殖,促進HaCat細胞的凋亡,并可以上調Bax mRNA及蛋白的表達。同時,清熱活血解毒復方
7、還可以降低TNF-α誘導的HaCaT細胞培養(yǎng)上清中IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8的濃度,其中可以顯著降低IFN-γ、IL-1β的濃度。
4.3結果顯示丹皮酚可以抑制HaCat細胞的增殖,促進HaCat細胞的凋亡。同時,丹皮酚可以降低HaCaT細胞上清中IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-8的濃度。
4.4結果顯示丹皮酚可以抑制TNF-α誘導的HaCat細胞的增殖,促進HaCat細胞的凋亡。同
8、時,丹皮酚還可以降低TNF-α誘導的HaCaT細胞上清中IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8的濃度。
5、結論:
由上研究結果可知,清熱活血解毒復方一方面可以上調促凋亡基因Bax的表達,進而誘導角質形成細胞的凋亡,以抑制角質形成細胞的異常增殖;另一方面,可以下調IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8的濃度,從而改善機體的免疫功能,以調整角質形成細胞的的異常增殖與分化、減少炎癥細胞的浸潤。
9、這兩方面可能是其治療銀屑病的機制。
丹皮酚一方面可以誘導角質形成細胞的凋亡,進而抑制角質形成細胞的異常增殖;另一方面,也可以下調IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8的濃度,從而改善機體的免疫功能,以調整角質形成細胞的的異常增殖與分化、減少炎癥細胞的浸潤。這兩方面可能是其治療銀屑病的機制。
但是由于中藥復方成分復雜,加之實驗條件有限,所以清熱活血解毒復方治療銀屑病的確切機制,仍需要我們做大量的研究工作。
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