MXR7在肝癌中甲基化的研究及MXR7抗體協(xié)同化療藥物對(duì)肝癌細(xì)胞殺傷作用的研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文MXR7在肝癌中甲基化的研究及MXR7抗體協(xié)同化療藥物對(duì)肝癌細(xì)胞殺傷作用的研究姓名：郭婷婷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：王紅陽(yáng)吳孟超200405012001級(jí)碗。學(xué)位論文中文摘要MXR7在肝癌中甲基化的研究及MXR7抗體協(xié)同化療藥物對(duì)肝癌細(xì)胞殺傷作用的研究中文摘要第一部分MXR7在肝癌中甲基化的研究目的一前期研究表明MXR7／GPC3基因在肝癌組織較癌旁組織中表達(dá)明顯增高，而在正常肝組織中

2、表達(dá)沉默。另發(fā)現(xiàn)該基因在多種肝癌細(xì)胞系中表達(dá)，但在其它21種非肝癌腫瘤細(xì)胞系中基本不表達(dá)。此外，MXR7基因在其它實(shí)質(zhì)性腫瘤中也均未見(jiàn)表達(dá)，這提示了該基因是肝癌內(nèi)高表達(dá)的較為特異性的標(biāo)志基因。但是，到目前為止MXR7基因在肝癌中的重新丌放的機(jī)制仍不甚清楚。由于該基因的第一外顯子內(nèi)含有1個(gè)CpG島，而且經(jīng)大量實(shí)驗(yàn)表明CpG島的甲基化與基因表達(dá)調(diào)控以及腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系，本課題對(duì)MXR7基因在肝癌中甲基化狀態(tài)與該基因重新開(kāi)放的關(guān)系

3、迸行初步研究，為深入闡明MXR7基因在肝癌中重新開(kāi)放的機(jī)理以及對(duì)肝癌發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并且為進(jìn)一步研究肝癌早期珍斷標(biāo)志物以及對(duì)肝癌的早期防治打下理論基礎(chǔ)。方法一采用甲基化檢測(cè)的常用方法。用EcoRI和甲基化敏感限制性?xún)?nèi)切酶EagI對(duì)20對(duì)肝癌組織及其相應(yīng)的癌旁組織、2例血管瘤組織以及2靜細(xì)胞(MCF一7、HepG2)的基因組DNA進(jìn)行單雙酶切反應(yīng)，并且針對(duì)MXR7基因特定甲基化位點(diǎn)設(shè)計(jì)一對(duì)引物，制備標(biāo)記a32pdCTP的探針。最后，

4、通過(guò)Southernblot方法檢測(cè)不同肝癌組織及其相應(yīng)癌旁組織中MXR7基因的甲基化狀態(tài)。結(jié)果與討論一研究發(fā)現(xiàn)在20對(duì)肝癌與癌旁組織中，有18例肝癌組織中的MXR7基因都呈現(xiàn)非甲基化狀態(tài)。而與其相應(yīng)的癌旁組織中，MXR7基因也均為非甲基化狀態(tài)。其中2對(duì)女性患者的肝癌組織中的MXR7基因?yàn)椴糠旨谆癄顟B(tài)。此外，MXR7基因在2例肝血管瘤組織以及肝癌細(xì)胞系HepG2中也為非甲基化狀態(tài)。這些結(jié)果與HsingchiLin等研究的卵巢癌細(xì)胞系中