蕓薹生鏈格孢轉(zhuǎn)錄因子ZnCys_Ab0012基因功能研究.pdf

1、Zn2Cys6家族轉(zhuǎn)錄因子是鋅簇家族轉(zhuǎn)錄因子中的C6型轉(zhuǎn)錄因子，是真菌比較常見的一類轉(zhuǎn)錄因子。該家族轉(zhuǎn)錄因子最早的研究是釀酒酵母中的GAL4基因，在稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)和禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）等植物病原真菌中也有比較多的研究。研究發(fā)現(xiàn)該類轉(zhuǎn)錄因子參與調(diào)控病菌的致病性、產(chǎn)孢量和病原菌的生長等生命過程。蕓薹生鏈格孢（Alternaria brassicicola）是引起十字花科植物

2、黑斑病的病原菌，給農(nóng)民帶來了比較嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前，對于蕓薹生鏈格孢（A. brassicicola）致病機(jī)制尚不明確，研究發(fā)現(xiàn)Zn2Cys6家族轉(zhuǎn)錄因子參與多種植物病原真菌的致病過程，且在蕓薹生鏈格孢（A. brassicicola）研究較少，因此進(jìn)行深入的研究就有助于我們認(rèn)識該菌的致病機(jī)制。
　　在本研究中，我們根據(jù)稻瘟病菌中Zn2Cys6家族MoNIT4基因，尋找到了其在蕓薹生鏈格孢（A. brassicicola）中的同

3、源基因ZnCys_Ab0012。據(jù)據(jù)同源重組的原理，采用原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化的方法，得到了ZnCys_Ab0012基因突變體，從而對蕓薹生鏈格孢（A. brassicicola）中ZnCys_Ab0012基因的功能進(jìn)行研究。
　　通過ZnCys_Ab0012基因缺失突變體與野生菌對比研究發(fā)現(xiàn)，ZnCys_Ab0012基因缺失突變體的生長速度是野生菌生長速度的1.96倍。通過對兩種菌表型的觀察發(fā)現(xiàn)，野生菌的生長以埋生菌絲為主，而ZnCys_

4、Ab0012基因缺失突變體以氣生菌絲的生長為主，且菌落顏色差異很大，ZnCys_Ab0012基因缺失突變體呈灰白色，而野生菌為深綠色。通過對于油菜的接種實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，ZnCys_Ab0012基因缺失突變體接種的油菜沒有表現(xiàn)出對葉片的致病性。通過對培養(yǎng)的菌株進(jìn)行顯微鏡觀察，我們發(fā)現(xiàn)，ZnCys_Ab0012基因缺失突變體菌株在顯微鏡下沒有觀察到孢子存在。同時通過對于穿透能力以及抗逆境生長能力的研究發(fā)現(xiàn)，ZnCys_Ab0012基因缺失突變體與