CARP基因功能研究.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文CARP基因功能研究姓名：石毅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：生物化學(xué)及分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：惠汝太20040501協(xié)和醫(yī)科大學(xué) C A R P 基因功能研究 2 0 0 1 級(jí)碩士研究生石毅A b s t r a c tC A R Pi sa n o v e lg e n e c l o n e di no u rI a b o r a t o r y ，l o c a l i z e d a tc h r o m

2、o s o m el O p l 3w i t h 1 5 e x o n s ．O u r p r e v i o u s s t u d y d e m o n s t r a t e d t h a t C A R P c o u l di n h i b i te e l lp r o l i f e r a t i o ni n7 k i n d so fh u m a nt u m o re e l l l i n e s

3、．I nt h i ss t u d y ，r e c o m b i n a n tC A R Pa d e n o v i r u s ( A d —C A R P ) w a sc o n s t r u c t e da n du s e dt oi n v e s t i g a t et h er o l eo f C A R Pi nt u m o r i g e n e s i s ．W ee x a m i n e d

4、t h ee x p r e s s i o nl e v e lo f C A R Pi n1 3c a n c e rt i s s u e sa n df o u n dt h a tC A R Pw a sd o w n —r e g u l a t e di n m o s tt e s t e dc a n c e rt i s s u e s - - b r e a s t ，u t e r u s ，o v a r y

5、，k i d n e y ，s t o m a c h ，r e c t u m ，t h y r o i da n dp r o s t a t e - - a s c o m p a r e d t o t h e c o r r e s p o n d i n gn o r m a lt i s s u e s 。T h e a d e n o v i r u s v e c t o r —m e d i a t e d C A

6、R P o v e r e x p r e s s i o ns i g n i f i c a n t l yr e d u c e dt h eg r o w t hr a t eo ft u m o rc e l ll i n e sa n ds u p p r e s s e da n c h o r a g e —i n d e p e n d e n tg r o w t hi ns o f ta g a r ．L e s

7、st h a n 2 0 ％o f c e l l si na l lA d —C A R P —t r a n s f e e t e d c e l l s s u r v i v e d o n d a y 7a f t e r t h e t r a n s f e c t i o n ．A d —C A R Pt r e a t m e n te l i m i n a t e dt h et u m o r i g e n

8、e s i si n d u c e db yA 5 4 9c e l l 1 i n eo fh u m a nl u n gc a n c e r ，c o m p a r e dw i t hA d —v e c t o rc o n t r o lg r o u p a n dt h eg r o u pw i t hu n t r e a t e dA 5 4 9 c e l l s ．A 5 4 9 一i n d u c e

9、 d t u m o rg r o w t h i n n u d em i c ew h oF e t e i v e d i n t r a t u m o r a ] i n j e c t i o no fh i g ht i t e rA d —C A R P ，a t at o t a ld o s eo f3 ×l O ?p f u ／t u m o r ，w e r es u p p r e s s e db

10、y m o r et h a n8 5 ％c o m p a r e d w i t ht h a t{ nn u d em i c ew h or e c e i v e di n j e c t i o no fe m p t yv e c t o ra t t h eS a m ed o s eo rw i t hP B S a l o n e ．T oe l u c i d a t e t h em o l e c u l a

11、rm e c h a n i s mo fC A R P ’sg r o w t hs u p p r e s s i n g f u n c t i o n ，w e t e s t e d t h e e f f e c t o f A d —C A R P 0 1 3 c e l ] c y c l ek i n e t j c sa n da p o p t o s i si nA 5 4 9c e l l s ．W ef o

12、u n dt h a tA d —C A R Pt r a n s f e c t i o nc a u s e dae e l lc y c l ea r r e s ta t t h eG 1 p h a s ea n do v e r e x p r e s s i o no ft h eC A R Pg e n e i n d u c e dc e l I a p o p t o s i s ．W e a 1s o t e s

13、t e d t h e a b i l i t y o f A d —C A R P t oa f f e c t t h e e e l l m o t i 1 i t y ， a n d f o u n d t h a t o v e r e x p r e s s i o n o f C A R P g e n ed r a m a t i c a l l Yi n h i b i t e dt u m o rc e 兒a d h