TSA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞MOLT-4凋亡前后基因表達(dá)變化的初步分析.pdf

1、背景與目的：研究表明組蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase，HDAC)在多種腫瘤中高表達(dá)，與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)。HDAC抑制劑曲古菌素A(trichostatinA，TSA)能以較低濃度誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制其增殖，但具體機(jī)制不甚明了。本實(shí)驗(yàn)擬研究TSA誘導(dǎo)白血病細(xì)胞株Molt-4細(xì)胞凋亡的規(guī)律及其作用的分子機(jī)理。方法：應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)、MTT、PI單標(biāo)流式細(xì)胞術(shù)、DNALadder觀察TSA誘導(dǎo)Molt-4細(xì)胞和健康人外

2、周血單個(gè)核細(xì)胞(normalhumanperipheralbloodmononuclearcell，PBMC)凋亡的效應(yīng)及規(guī)律，用基因芯片(microarray)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscription-polymerasechainreaction，RT-PCR)等方法檢測特定劑量TSA作用Molt-4細(xì)胞一定時(shí)間后基因表達(dá)的差異。結(jié)果：TSA能以時(shí)間、劑量依賴性方式誘導(dǎo)Molt-4細(xì)胞凋亡并抑制細(xì)胞增殖。TSA

3、在顯著誘導(dǎo)Molt-4細(xì)胞凋亡的劑量和時(shí)間范圍內(nèi)對PBMC無明顯的誘導(dǎo)凋亡作用，具有良好的治療指數(shù)。TSA分別處理9h、18h，基因芯片分析發(fā)現(xiàn)9h時(shí)Molt-4細(xì)胞基因表達(dá)下調(diào)的有313個(gè)，占芯片所能檢測到的總基因數(shù)的2.2％，18h時(shí)Molt-4細(xì)胞基因表達(dá)下調(diào)的有395個(gè)，占芯片所能檢測到的總基因數(shù)的2.8％。兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)均下調(diào)的基因共145個(gè)，編碼產(chǎn)物包括信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子、轉(zhuǎn)錄因子、酶、受體等，其生物學(xué)功能涉及調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化發(fā)育、