萎縮性膽囊炎膽囊上皮細(xì)胞端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達(dá)的研究.pdf

1、背景和目的原發(fā)性膽囊癌缺乏特異性的臨床表現(xiàn)，早期診斷極不容易，大部分患者在就診發(fā)現(xiàn)時(shí)多處于中晚期，手術(shù)切除率低，預(yù)后多不佳，總的5年生存率小于5％。由于目前膽囊癌主要治療手段以手術(shù)治療為主，化療、放療及生物治療等方法均不敏感，故有學(xué)者提出對(duì)膽囊癌高危人群施行“預(yù)防性膽囊切除術(shù)”是改善膽囊癌預(yù)后的重要措施。Rothenberg等的調(diào)查表明，由于對(duì)50歲以上患慢性膽囊炎者實(shí)施選擇性膽囊切除術(shù)，膽囊癌發(fā)病率下降了21.5％。但是膽囊切除術(shù)仍有

2、一定的并發(fā)癥率。因此如何確定“預(yù)防性膽囊切除術(shù)”的合適人群，是當(dāng)前膽囊癌預(yù)防及治療的亟待解決的問題。 萎縮性膽囊炎是膽囊結(jié)石的一種特殊類型，表現(xiàn)為膽囊炎癥反復(fù)發(fā)生，膽囊萎縮明顯，囊壁增生變厚，囊內(nèi)多充滿結(jié)石，正常組織被纖維結(jié)締組織取代。萎縮性膽囊炎的不典型增生、腸上皮化生發(fā)生率遠(yuǎn)比一般慢性膽囊炎要高，故通常被認(rèn)為是癌前病變。 端粒酶是一個(gè)核糖復(fù)合體，主要由人端粒酶RNA(HTR)，人端粒酶相關(guān)蛋白(HEEP1)和人端粒酶

3、逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)，其中hTETR是端粒酶的催化亞單位。端粒酶與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)，已有眾多研究發(fā)現(xiàn)端粒酶在肝、肺、胃、腸等惡性腫瘤中有表達(dá)，其表達(dá)率為80％以上，而在良性組織中其表達(dá)率在1％～4％。hTERTmRNA水平與端粒酶活性密切相關(guān)，hTERT的激活對(duì)腫瘤細(xì)胞中端粒酶活性的激活是必須和足夠的，hTERT的表達(dá)是端粒酶活化和細(xì)胞癌變的限速步驟。hTERT是檢測腫瘤及其癌前病變的可靠指標(biāo)。 本實(shí)驗(yàn)擬采用免疫組化S

4、P法檢測萎縮性膽囊炎上皮的端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達(dá)，并分析其與患者年齡、性別、病程、膽囊壁厚度與結(jié)石直徑等5個(gè)臨床參數(shù)之間的關(guān)系，旨在對(duì)萎縮性膽囊炎的癌變傾向進(jìn)行研究，并為臨床上合理掌握“預(yù)防性膽囊切除術(shù)”的時(shí)機(jī)和指證提供理論依據(jù)，從而提高膽囊癌的預(yù)防能力，改善膽囊癌的預(yù)后。 材料和方法1.病例選擇取2001年～2002年浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院膽囊切除術(shù)病例50例，另選同期病理診斷慢性單純性膽囊炎10例及原發(fā)性膽囊癌16例(限于

5、NevinⅡ、ⅢⅡ期)作為對(duì)照組。 2.免疫組化染色所有膽囊標(biāo)本經(jīng)10％福爾馬林溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm連續(xù)切片，以SP法檢測hTERT的表達(dá)。操作步驟按試劑說明書執(zhí)行，設(shè)立陽性及陰性對(duì)照。hTERT以細(xì)胞胞漿或胞核上出現(xiàn)棕黃色作為陽性細(xì)胞。細(xì)胞無棕色反應(yīng)或背景同空白對(duì)照者為陰性。對(duì)hTERT表達(dá)作定性分析。 3.數(shù)據(jù)處理hTERT陽性率采用spss11.5卡方檢驗(yàn)。結(jié)果1.萎縮性膽囊炎組hTERT陽性表達(dá)率為48

6、.0％(24/50)，慢性單純性膽囊炎組hTERT陽性表達(dá)率為0％，兩者差異具有顯著性意義(P=0.007)。16例原發(fā)性膽囊癌hTERT表達(dá)87.5％(14/16)，與萎縮性膽囊炎組相比，兩者差異也具有顯著性意義(P=0.013)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，萎縮性膽囊炎組的hTERT陽性表達(dá)率明顯高于慢性單純性膽囊炎(P=0.007)，進(jìn)一步證實(shí)了萎縮性膽囊炎的高癌變傾向。 2.本病例組中hTERT的陽性表達(dá)率與患者年齡、病程及結(jié)石直徑

7、等3個(gè)臨床參數(shù)存在相關(guān)性。具體如下：年齡≥50歲者，hTERT陽性表達(dá)率為62.1％(18/29)，年齡＜50歲者為28.6％(6/21)，兩者差異具有顯著性意義(P=0.040)；病史≥5年者h(yuǎn)TERT表達(dá)率為63.2％(12/19)，病史＜5年者為38.7％(12/31)，兩者差異具有顯著性意義(P=0.019)；結(jié)石直徑≥1.0cm者h(yuǎn)TERT陽性表達(dá)率為64.5％(20/31)，結(jié)石直徑＜1.0cm者為21.5％(4/19)，兩

8、者差異具有顯著性意義(P=0.007)。本病例組hTERT的陽性表達(dá)率與患者性別、膽囊壁厚度無明顯相關(guān)性，男性和女性的hTERT的陽性表達(dá)率分別為53.5％(8/15)和45.7％(16/35)，P=0.853；膽囊壁厚度≥0.40cm者h(yuǎn)TERT的陽性表達(dá)率為53.8％(21/39)，膽囊壁厚度＜0.40cm者為27.2％(3/11)，P=0.224。 結(jié)論1.萎縮性膽囊炎中hTERT的表達(dá)率高于慢性單純性膽囊炎。2.萎縮性膽