版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、第一章肝細(xì)胞肝癌實(shí)體瘤及相應(yīng)癌旁組織中的鞘糖脂表達(dá)的質(zhì)譜表征
目的:運(yùn)用糖組學(xué)方法研究肝細(xì)胞肝癌患者實(shí)體瘤樣本中的鞘糖脂表達(dá)情況,對比同一個(gè)體來源的癌旁組織,找出明顯差異表達(dá)的鞘糖脂結(jié)構(gòu),從而找出肝細(xì)胞肝癌相關(guān)的特征性鞘糖脂為肝細(xì)胞肝癌診斷、治療等提供新的靶點(diǎn),并為異常的鞘糖脂在肝細(xì)胞肝癌的生物學(xué)行為中所發(fā)生的作用提供初步的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。
方法:(1)采用有機(jī)試劑溶液超聲波組合式提取的技術(shù)從肝細(xì)胞肝癌的實(shí)體瘤樣本中提取出
2、總脂質(zhì);(2)利用DEAE-Sephedex A25層析法分離純化出酸中性鞘糖脂;(2)將所得的脂質(zhì)用乙?;揎棽⒂霉杷徭V柱層析的方法去除其中的磷脂類進(jìn)一步純化鞘糖脂;(4)HPTLC的方法初步分析從肝癌和癌旁組織中提取出來的鞘糖脂;(5)完全甲基化方法修飾所分離純化的鞘糖脂,并經(jīng)由LTQ-ESI MS質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行初步分析;(6) ROC曲線法分析質(zhì)譜數(shù)據(jù)中異常的鞘糖脂。
結(jié)果:(1)同一個(gè)體來源的肝癌和癌旁初級總離子流譜圖顯
3、示出在肝癌中的m/z1600到m/z2000范圍內(nèi)出現(xiàn)的一群異常表達(dá)的鞘糖脂結(jié)構(gòu);(2)2級質(zhì)譜分析研究的結(jié)果顯示有三組異常的鞘糖脂本別是m/z1086,m/z1260,m/z1290,這三組異常的鞘糖脂均為被巖藻糖基化所修飾,并發(fā)現(xiàn)這三組異常鞘糖脂在肝癌組織中的表達(dá)水平顯著高于相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)水平;(3)通過 SPSS軟件的 ROC曲線法(受試者特征工作曲線)分析32對肝細(xì)胞肝癌患者的肝瘤組織以及相應(yīng)的癌旁組織質(zhì)譜總離子流圖數(shù)據(jù)發(fā)
4、現(xiàn)m/z1086的AUC(曲線下面積)值是0.809, m/z1260的AUC值是0.722,m/z1290的AUC值為0.953.
結(jié)論:肝細(xì)胞肝癌患者的實(shí)體瘤樣本中鞘糖脂的表達(dá)區(qū)別于同一個(gè)體來源的癌緣組織,其中在初級質(zhì)譜數(shù)據(jù)上可見明顯的一系列鞘糖脂的異常表達(dá),這些明顯異常表達(dá)的鞘糖脂經(jīng)初步的結(jié)構(gòu)定性發(fā)現(xiàn)均為巖藻糖基化修飾的鞘糖脂結(jié)構(gòu),受試者特征曲線說明一群三組巖藻糖基化的鞘糖脂其作為診斷靶點(diǎn)具有診斷效力,說明異常的巖藻糖基
5、化鞘糖脂作為治療診斷治療靶點(diǎn)的潛在價(jià)值。
第二章肝細(xì)胞肝癌中異常巖藻糖基化鞘糖脂的定性分析及其作為潛在靶點(diǎn)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)
目的:通過質(zhì)譜準(zhǔn)確定性異常的巖藻糖基化的鞘糖脂所有的結(jié)構(gòu),并找出其中可以作為診斷治療靶點(diǎn)的的可能結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。
方法:(1)利用多級質(zhì)譜方法結(jié)合相關(guān)的鞘糖脂標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行精確的異常鞘糖脂結(jié)構(gòu)的表征;(2) ChemDraw等結(jié)構(gòu)分析軟件的結(jié)合多級質(zhì)譜法結(jié)合定性;(3)多級質(zhì)譜檢測肝癌細(xì)胞系的異常巖藻
6、糖基化鞘糖脂表達(dá)情況;(4)多級質(zhì)譜檢測肝癌病患血清中異常巖藻糖基化鞘糖脂表達(dá)情況(5)采用Real-Time PCR技術(shù)檢測肝癌組織中相關(guān)巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)情況。
結(jié)果:(1)多級質(zhì)譜對異常巖藻糖基化的鞘糖脂表征揭示其中含有TypeⅠ/ⅡH antigen,Lewis x,Lewisy,Lewis a,Lewis b,Globo H等結(jié)構(gòu),其中巖藻糖基化五糖m/z1086中主要成分為Type H antigen,雙巖藻糖基
7、化六糖m/z1260含有Lewis b與Lewisy,巖藻糖基化六糖m/z1290是Globo H;(2)三種肝癌細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)了和肝癌組織中類似的結(jié)果,均含異常糖基化鞘糖脂結(jié)構(gòu),如Globo H;(3)肝癌患者血清鞘糖脂的質(zhì)譜表征發(fā)現(xiàn)有與肝細(xì)胞肝癌腫瘤組織相似的結(jié)果;(4)以糖組學(xué)的視角來分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),這些異常的巖藻糖基化鞘糖脂均含有相同的末端Fucɑ1-2Gal-結(jié)構(gòu)域,其質(zhì)譜表征圖與Fucɑ1-2Gal的標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)譜表征圖高度匹配,
8、從而證實(shí)了我們的結(jié)果;(4)巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶 FUT1和 FUT2的檢測結(jié)果表明在不同的肝癌個(gè)體樣本中其表達(dá)情況是不同的,揭示FUT1和FUT2在不同肝癌病人中其負(fù)責(zé)Fucɑ1-2Gal-的合成能力會有差異。
結(jié)論:肝癌樣本中異常表達(dá)的巖藻糖基化結(jié)構(gòu)含有H antigen,Globo H等多種的異常巖藻糖基化結(jié)構(gòu),揭示肝癌樣本中鞘糖脂的異常巖藻糖基化是復(fù)雜多變的,然而糖鏈組成的特點(diǎn)讓我們能夠從糖鏈本身的結(jié)構(gòu)入手,找到異常巖藻糖基
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 類鞘糖脂的合成.pdf
- 乳腺癌異常鞘糖脂的表達(dá)及其功能的研究.pdf
- 海洋糖脂glycolipids simplexides和系列鞘糖脂類化合物的合成及其生物活性研究.pdf
- 急性髓細(xì)胞白血病中鞘糖脂的表達(dá)及其功能研究.pdf
- 鞘糖脂人工生物合成關(guān)鍵酶的結(jié)構(gòu)、功能及分子改造.pdf
- 一系列鞘糖脂類化合物的合成.pdf
- 鞘糖脂Gb3的配體結(jié)構(gòu)對其胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)挠绊?pdf
- 哺乳動(dòng)物上皮細(xì)胞中鞘糖脂在登革病毒感染中的作用.pdf
- 海洋鞘糖脂clarhamnoside的全合成及系列KRN7000類似物的合成研究.pdf
- 免疫活性細(xì)胞和腫瘤耐藥細(xì)胞的中性鞘糖脂表達(dá)與腫瘤免疫的相關(guān)關(guān)系研究.pdf
- C18-鞘糖脂在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其在耐藥中的功能研究.pdf
- 糖脂寧膠囊事件第八組
- 凋亡相關(guān)蛋白、中性鞘糖脂與人卵巢癌細(xì)胞株COC1-DDP多藥耐藥相關(guān)性及逆轉(zhuǎn)的研究.pdf
- 鞘氨醇激酶1對肝癌耐藥細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf
- 芪藍(lán)糖脂寧膠囊復(fù)方再優(yōu)化研究及其糖脂雙調(diào)的機(jī)理探討.pdf
- 具鞘微鞘藻對干旱脅迫的響應(yīng)機(jī)理.pdf
- 槐糖脂合成的氮源代謝調(diào)控及槐糖脂的廉價(jià)底物生產(chǎn)和性質(zhì)研究.pdf
- 大黃多糖脂質(zhì)體的研究.pdf
- 原發(fā)性IgA腎病的糖脂代謝特征及臨床診治研究.pdf
- 脊髓神經(jīng)鞘瘤
評論
0/150
提交評論