大豆WRKY基因轉化煙草(Nicotiana tabacum)的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、WRKY蛋白是近年才發(fā)現(xiàn)的一類轉錄因子家族，廣泛參與植物對生物與非生物脅迫應答反應。在生物脅迫、防衛(wèi)反應信號分子、干旱、低溫、創(chuàng)傷和重金屬等不同的環(huán)境脅迫條件下能被誘導表達，同時參與植物發(fā)育進程中多種基因的表達和代謝的調控。
　　本研究以野生型煙草(Nicotiana tabacum)為試驗材料，通過根癌農(nóng)桿菌LBA4404介導的向煙草導入大豆WRKY基因HY22-2和HY23-2基因的遺傳轉化研究。試驗結果表明：用 OD600為

2、0.5的農(nóng)桿菌侵染5mi，共培養(yǎng)3天條件下，獲得的28株轉HY22-2基因卡那霉素抗性植株，經(jīng)PCR檢測，7株擴增出特異條帶，轉化率為17.5％；獲得的35株轉HY23-2基因卡那霉素抗性植株，經(jīng)PCR檢測，9株擴增出特異條帶，轉化率為21.7%。用RT-PCR法檢測PCR獲得的陽性植株，結果均擴增出目的條帶，說明目的基因 HY22-2和HY23-2已整合到煙草的基因組中并表達。
　　本研究從非生物脅迫，鹽和低溫兩個方面對轉基因煙

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