新生公犢牛小腸、肝臟和泌乳奶牛肝臟蛋白質(zhì)組表達(dá)譜分析.pdf

1、隨著中國奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，如何實(shí)現(xiàn)犢牛的高效健康培育以及泌乳奶牛生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)奶應(yīng)當(dāng)?shù)玫匠浞种匾?。在此階段，小腸和肝臟發(fā)揮完善的生理功能將是維持其健康生產(chǎn)的關(guān)鍵。然而，關(guān)于小腸和肝臟在新生公犢牛以及肝臟在泌乳奶牛上的生理機(jī)制了解較少。對(duì)此，本研究使用LC-MS/MS蛋白質(zhì)組學(xué)研究策略構(gòu)建了小腸和肝臟蛋白質(zhì)表達(dá)譜，以期在蛋白質(zhì)水平為深入了解其生理機(jī)制提供參考依據(jù)。具體研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1.采集出生后約2h未采食初乳的中國荷斯坦公犢

2、牛小腸，構(gòu)建蛋白質(zhì)組表達(dá)譜。結(jié)果顯示:十二指腸、空腸和回腸分別鑒定到1184、1616和1127個(gè)蛋白質(zhì)，KEGG通路分析發(fā)現(xiàn)，多數(shù)蛋白質(zhì)參與能量代謝通路和免疫應(yīng)答過程;蛋白質(zhì)相互作用(protein-protein interaction，PPI)發(fā)現(xiàn)，泛素-40S核糖體蛋白S27a、絲氨酸/蘇氨酸-蛋白磷酸酶2A、熱激蛋白70、真核生物起始因子4A-Ⅲ與其他蛋白有更多的相互作用。
　　2.犢牛小腸差異蛋白組學(xué)研究。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

3、表明:犢牛十二指腸與空腸差異表達(dá)蛋白178個(gè);十二指腸與回腸差異表達(dá)蛋白218個(gè);空腸與回腸差異表達(dá)蛋白373個(gè)。在生物學(xué)過程，十二指腸與空腸差異表達(dá)絨毛蛋白-1和絲束蛋白-1涉及調(diào)節(jié)微絨毛長度。此外，空腸與回腸差異表達(dá)蛋白中涉及腸的吸收有4個(gè)、凋亡過程的有26個(gè)、T細(xì)胞共同刺激的有3個(gè)。PPI分析發(fā)現(xiàn)，熱激蛋白90β、肌動(dòng)蛋白和細(xì)胞色素C氧化酶亞基6B1分別在十二指腸與空腸、十二指腸與回腸以及空腸與回腸差異表達(dá)蛋白中與其他蛋白有更多相

4、互作用。
　　3.采集犢牛肝臟，構(gòu)建蛋白質(zhì)組表達(dá)譜。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)鑒定的蛋白質(zhì)與葡萄糖、脂肪酸和氨基酸代謝通路相關(guān)。PPI分析發(fā)現(xiàn)，蛋白激酶Cα、有絲分裂檢測(cè)點(diǎn)蛋白BUB3、泛素-40S核糖體蛋白S27a和轉(zhuǎn)化蛋白R(shí)hoA與其他蛋白質(zhì)有更多的相互作用。
　　4.采集健康泌乳中國荷斯坦奶牛肝臟，質(zhì)譜鑒定建立蛋白質(zhì)表達(dá)譜，其中16.7％的鑒定蛋白具有跨膜區(qū)域，12.8％的蛋白具有信號(hào)肽。GO功能分類發(fā)現(xiàn)，多數(shù)蛋白在分子功能涉及