綠原酸與三種生物大分子相互作用的研究.pdf

1、蛋白質(zhì)作為參與生命活動(dòng)的主要物質(zhì)，在生命過(guò)程中起著極其重要的作用。隨著蛋白質(zhì)研究的逐步深入，人們對(duì)蛋白質(zhì)與配體分子相互作用的研究也成為生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。研究蛋白質(zhì)與小分子物質(zhì)之間的相互作用，不僅可以揭示二者相互作用的配位本質(zhì)，了解蛋白質(zhì)的構(gòu)象變化，而且對(duì)改進(jìn)和發(fā)展分析蛋白質(zhì)的新方法有促進(jìn)作用。本論文采用紫外-可見(jiàn)吸收、熒光、圓二色譜、傅立葉紅外等分子光譜法，以溶菌酶、牛血清白蛋白和人血清蛋白為模型蛋白，研究這三種蛋白質(zhì)與小分子物質(zhì)

2、綠原酸的相互作用機(jī)理。本論文包括四個(gè)章節(jié)內(nèi)容。
　　 第一章文獻(xiàn)綜述。這一章簡(jiǎn)要介紹了小分子綠原酸的特性及其應(yīng)用，三種模型蛋白溶菌酶、牛血清蛋白和人血清蛋白的結(jié)構(gòu)和功能性質(zhì)，概述了研究蛋白質(zhì)與小分子物質(zhì)相互作用的研究方法及意義。
　　 第二章綠原酸與溶菌酶相互作用的研究。本章研究了在不同pH條件下綠原酸的吸收光譜的變化，結(jié)果表明:吸收?qǐng)D譜在峰形及峰位置上均發(fā)生了明顯變化。結(jié)合各種光譜法（紫外-可見(jiàn)吸收光譜、熒光光譜、圓二

3、色譜以及傅立葉紅外光譜），探討了綠原酸與溶菌酶的相互作用。熒光光譜結(jié)果表明:綠原酸能有規(guī)律地猝滅溶菌酶的內(nèi)源熒光，低濃度綠原酸與溶菌酶間的相互作用為靜態(tài)猝滅過(guò)程，而當(dāng)綠原酸濃度上升到4.0×10-5mol/L時(shí)，兩者間的熒光猝滅過(guò)程變?yōu)閯?dòng)態(tài)猝滅。參照猝滅常數(shù)及熱力學(xué)參數(shù)計(jì)算公式推導(dǎo)出兩者的作用類型及結(jié)合位點(diǎn)數(shù)，非輻射能量轉(zhuǎn)移理論測(cè)定出兩者間的結(jié)合距離r值為3.65nm。CD及FT-IR分析了綠原酸結(jié)合后對(duì)溶菌酶空間構(gòu)象的變化，酶構(gòu)象向緊

4、密方向改變，α-螺旋的含量增加。最后，測(cè)定了綠原酸作用后對(duì)溶菌酶酶活力的影響，結(jié)果表現(xiàn)為激活作用。
　　 第三章綠原酸與血清蛋白相互作用的研究。本章利用紫外-可見(jiàn)吸收光譜、熒光光譜、圓二色譜對(duì)比研究了綠原酸與兩種血清蛋白在生理?xiàng)l件下的相互作用。分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)綠原酸與兩種血清蛋白的相互作用的機(jī)理幾乎一致，作用類型均為靜電相互作用。猝滅常數(shù)及結(jié)合位點(diǎn)數(shù)的研究表明HSA與CA的結(jié)合作用更強(qiáng)。圓二色譜分析得出，綠原酸的存在使兩種血清蛋白的