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文檔簡介
1、目的:1、觀察尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)與硫氧還蛋白-1(Trx-1)在高糖作用下腹膜間皮細(xì)胞中的表達(dá)并探討其意義;2、觀察N-乙酰半胱氨酸(NAC)對NOX2與Trx-1因子表達(dá)的影響,研究其對延緩腹膜纖維化發(fā)生的可能的調(diào)節(jié)機(jī)制。
方法:30只健康雄性SD大鼠,體重250±30g,按隨機(jī)分組法分成3組,每組10只。對照組(NS組):每只大鼠每天一次腹腔注射生理鹽水25ml,28天后,每天一次用生理鹽水5m
2、l灌胃,一共灌胃8周。高糖模型組(HGC組):每只大鼠每天一次注射4.25%的葡萄糖腹透液25ml,脂多糖(LPS)用4.25%葡萄糖腹透液稀釋為6mg/L,在第8、10、12、22、24、26天腹腔注射LPS(0.6mg/kg體重),建立腹膜纖維化模型,28天后,每天一次用生理鹽水5ml灌胃,一共灌胃8周。N-乙酰半胱氨酸治療組(NAC組):在上述腹膜纖維化模型基礎(chǔ)上,加用(N-乙酰半胱氨酸+生理鹽水)混懸液5ml(100mg/kg/
3、d)每天一次口服灌胃,一共灌胃8周。常規(guī)飼養(yǎng)SD大鼠,實驗周期12周。于實驗最后1天斷頭法處死所有大鼠,取腹膜組織行HE染色病理學(xué)檢查及免疫組化檢測壁層腹膜組織細(xì)胞 NOX2與硫氧還蛋白-1(Trx-1)的表達(dá)。
結(jié)果:①各組大鼠壁層腹膜組織形態(tài)學(xué)變化(HE染色):光鏡下,NS組腹膜規(guī)律覆蓋間皮細(xì)胞,其下為少量纖維結(jié)締組織,基質(zhì)很薄,無明顯損傷,腹膜結(jié)構(gòu)較完整。HGC組和NAC組可見間皮細(xì)胞脫落,間皮下結(jié)締組織增厚,可見部分成
4、纖維樣細(xì)胞及單核巨噬細(xì)胞浸潤且有纖維素樣物質(zhì)沉積,且腹膜組織新生小血管也有增多,HGC組的上述現(xiàn)象較為明顯。②各組大鼠腹膜組織中NOX2、Trx-1的免疫組化結(jié)果及圖像分析:1)免疫組化染色結(jié)果:NS組NOX2、Trx-1幾乎不表達(dá),HGC組及NAC組NOX2、Trx-1在間皮細(xì)胞的胞漿和胞核都有陽性表達(dá),背景幾乎沒有顏色或呈淺棕色,陽性產(chǎn)物為深淺不等、形狀不規(guī)則棕色顆粒,尤以HGC組明顯。2)圖像分析:經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,各組NOX2、Tr
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