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文檔簡介
1、目的:明確不同牽拉力強度對大隱靜脈損傷程度的關(guān)系,定義無損傷牽拉力,并初步探討其對RhoA/ROK信號通路的表達差異和在橋血管損傷的作用機制的調(diào)節(jié)。
方法:60例無張力條件下獲取的小腿大隱靜脈,隨機分為5組,每組12例:A組為對照組,無牽拉(<10g,0.098牛頓),剩余標本在同一方向的不同強度拉力持續(xù)牽拉3min。B組為牽拉力20g(0.196牛頓),C組為牽拉力40g(0.392牛頓),D組為牽拉力60g(0.588牛頓
2、),E組為牽拉力80g(0.784牛頓)。獲取的樣本應(yīng)用CUSTODTOL HTK液(心肌保護麻痹溶液)保護組織完整性,予不同牽拉力處置,放入福爾馬林液中固定,石蠟包埋,HE染色行病理檢查,高倍鏡(400X)下觀察切片病理改變。應(yīng)用免疫組化方法,檢測 RhoA、ROCK蛋白表達量水平。通過免疫組化的方法,應(yīng)用細胞核抗原染色,測定平滑肌細胞增殖水平。應(yīng)用Western-blot方法測定橋血管 RhoA、ROCK的表達水平。
結(jié)果
3、:RhoA/ROCK蛋白在牽張力損傷大隱靜脈中均有表達,且與大隱靜脈損傷程度成正相關(guān),所受牽張力強度越大,其表達水平越高;隨著牽拉時間的增加,RhoA/ROCK的表達水平升高,RhoA/ROCK蛋白在牽拉3min后表達水平高于無張力組(P<0.05),牽拉5min達到峰值(P<0.01),牽拉10min表達水平與5min無異,和無張力組相比顯著升高。
結(jié)論:RhoA/ROCK通路激活是牽張力損傷大隱靜脈的重要機制之一,根據(jù) R
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