山羊卵泡中CEEF的來源以及山羊COC對CEEF反應性的發(fā)育.pdf

1、在排卵前，經(jīng)一系列內(nèi)源性促性腺激素峰的刺激，圍繞在卵母細胞周圍的緊實的卵丘細胞發(fā)生擴展，這種現(xiàn)象稱為卵丘擴展或粘液化。卵丘擴展對排卵和受精過程都具有重要的意義。研究表明卵丘擴展需要一種卵丘擴展促進因子(cumulus expansion enabIing factors，CEEF)的作用。本文研究了山羊卵泡中CEEF的來源以及山羊COC對CEEF反應性的發(fā)育。我們使用種間測試系統(tǒng)，應用小鼠摘除卵母細胞的卵丘卵母細胞復合體(oocytec

2、omized complex，OOX)，檢測山羊不同時期的卵母細胞以及卵泡內(nèi)的其它細胞成分產(chǎn)生CEEF的能力。另外，我們以山羊0.8-1.5mm小卵泡中的COCs為研究對象，分析小卵泡中卵丘擴展能力較差的原因。 結果如下： 1．山羊的卵丘擴展不依賴于卵母細胞的存在。 2．山羊GV期卵母細胞能分泌CEEF，而MⅡ期卵母細胞不能分泌CEEF，并且不同類型的GV期卵母細胞分泌CEEF的能力和所分泌CEEF的活性無明顯差

3、異。 3．山羊和小鼠透明帶都不含有CEEF的成分，完全是由卵本身分泌的。 4．來自2-4mm卵泡的山羊OOX具有分泌CEEF的能力，卵泡壁顆粒細胞不能分泌CEEF。卵泡液中含有CEEF，并且CEEF的活性隨卵泡液的濃度增加而降低。小鼠OOX在含有10％2-4mm卵泡的卵泡液的M199中培養(yǎng)時擴展比率最高(71％)，但當濃度為70％時，小鼠OOX擴展率僅為8.3％。 5．山羊GV期和MⅡ期的卵丘細胞都能分泌CEEF

4、，但山羊胎兒成纖維細胞、生精細胞混合物和山羊輸卵管上皮細胞都不產(chǎn)生CEEF。并且不管是GV期卵丘細胞還是MⅡ期卵丘細胞，隨著其傳代次數(shù)和貼滿天數(shù)的增加，分泌CEEF的能力下降。 6．小鼠精原細胞，精母細胞及支持細胞作為卵母細胞和顆粒細胞的雄性同源物都不分泌CEEF。STO細胞也不具備分泌CEEF的能力。 7．0.8-1.5 mm小卵泡的卵母細胞和壁顆粒細胞都具有分泌CEEF的能力并且小卵泡液中也有CEEF活性，而且CEE