兩種不同來源樺褐孔菌多糖的抗氧化與免疫活性的研究.pdf

1、樺褐孔菌屬于擔(dān)予菌亞門、層菌綱、非褐菌目、刺革菌科。在俄羅斯和北半球某些國家民間有很長的應(yīng)用歷史,多糖是樺褐孔菌和大多數(shù)藥用真菌生物活性的主要成份,并且已證明具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)以及許多對(duì)健康有明顯影響的活性如:抗氧化。但樺褐孔菌天然資源匱乏、價(jià)格昂貴、還沒有成熟的人工培養(yǎng)方法,所以開發(fā)利用樺褐孔菌有重大的意義。
　　 本論文從比較樺褐孔菌子實(shí)體多糖和發(fā)酵產(chǎn)物多糖抗氧化活性和免疫調(diào)節(jié)活性入手,對(duì)這兩種不同來源的多糖采用BCA蛋白

2、濃度測(cè)定試劑盒分析蛋白含量,苯酚-硫酸法測(cè)定多糖的含量,利用氣相色譜(GC)進(jìn)行單糖組分分析,以脫氧核糖為指標(biāo)測(cè)定多糖清除羥基自由基活性,選擇有機(jī)自由基DPPH測(cè)定多糖對(duì)其的清除活性,以硝普鈉在體外產(chǎn)生NO測(cè)定多糖對(duì)NO自由基清除活性,選擇富含脂質(zhì)的鼠肝細(xì)胞測(cè)定其抗脂質(zhì)過氧化活性,用CCK-8測(cè)定其對(duì)人的外周血單個(gè)核細(xì)胞增殖活性以及通過其對(duì)細(xì)胞因子TNF-α和IFN-γ的影響對(duì)其免疫調(diào)節(jié)活性進(jìn)行研究。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:(1)

3、與樺褐孔菌子實(shí)體多糖相比,其發(fā)酵產(chǎn)物多糖的多糖含量較高、蛋白質(zhì)含量較低;(2)單糖組分的分析,表明子實(shí)體和發(fā)酵產(chǎn)物胞外多糖都是葡萄糖含量最高,而發(fā)酵產(chǎn)物胞內(nèi)多糖的半乳糖含量最高;(3)樺褐孔菌多糖對(duì)羥基自由基清除的活性,隨著濃度的增加清除活性依次增強(qiáng)。除蛋白后的多糖和未除蛋白的多糖清除活性相當(dāng),發(fā)酵產(chǎn)物多糖的清除活性較強(qiáng),子實(shí)體過DEAE-纖維素柱分離后的多糖清除活性最差。(4)樺褐孔菌多糖對(duì)DPPH自由基清除活性,發(fā)酵產(chǎn)物多糖對(duì)DPP

4、H自由基的清除活性較差,子實(shí)體多糖清除活性較強(qiáng),兩種多糖的清除活性與多糖濃度無關(guān)。(5)樺褐孔菌多糖抗脂質(zhì)過氧化活性測(cè)定,結(jié)果和羥基自由基活性測(cè)定結(jié)果相似,都證明發(fā)酵產(chǎn)物多糖具有較強(qiáng)的抗氧化活性;(6)樺褐孔菌多糖對(duì)NO清除活性測(cè)定,子實(shí)體多糖對(duì)NO的清除活性較強(qiáng),發(fā)酵產(chǎn)物多糖較差,兩種不同來源多糖的清除活性都隨著濃度的增加而增強(qiáng);(7)在人的外周血單個(gè)核細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中,證明兩種多糖均具有一定的增殖活性,其中子實(shí)體的增殖活性強(qiáng)于發(fā)酵產(chǎn)物

5、;(8)在對(duì)細(xì)胞因子TNF-α和JFN-γ測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,子實(shí)體多糖在不同的濃度下對(duì)細(xì)胞因子TNF-α的作用不同、對(duì)細(xì)胞因子IFN-γ的作用相同,而發(fā)酵產(chǎn)物多糖在不同的濃度下對(duì)兩種細(xì)胞因子均表現(xiàn)出較強(qiáng)的清除活性。
　　 總結(jié)以上結(jié)果我們得出,樺褐孔菌發(fā)酵產(chǎn)物多糖具有較強(qiáng)的抗氧化性,對(duì)人的外周血單個(gè)核細(xì)胞具有增殖活性,對(duì)細(xì)胞因子FNF-α和IFN-γ具有一定的清除活性,這為抗衰老藥物的研發(fā)以及由細(xì)胞因子含量較高引起的疾病的治療提供了重