液體深層發(fā)酵培養(yǎng)樺褐孔菌胞外多糖的化學(xué)性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及抗氧化活性研究.pdf

1、樺褐孔菌(Inonotus obliquus)屬于擔(dān)子菌亞門,層菌綱,非褶菌目,多孔菌科,褐臥孔菌屬,是一種珍稀的食藥用真菌。主要分布于北半球北緯45°～50°的地區(qū),是生長在寒帶的木腐菌。樺褐孔菌含有多種活性成分,其開發(fā)應(yīng)用價值非常廣泛。樺褐孔菌多糖是樺褐孔菌中含有的一種重要的生物活性物質(zhì),它具有抗。自由基氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗衰老、降血糖、抗腫瘤等活性,然而樺褐孔菌天然資源稀缺,價格昂貴,直接從野生樺褐孔菌中提取活性物質(zhì)成本很高且不利于

2、自然資源的保護(hù)。本文采用液體深層發(fā)酵培養(yǎng)樺褐孔菌的方法獲取樺褐孔菌胞外多糖,研究了用響應(yīng)面法優(yōu)化的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和在此基礎(chǔ)上加入玉米秸稈作為木質(zhì)纖維素來源的培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)的樺褐孔菌胞外多糖(分別記作EPC和EPL),并比較了這兩種胞外多糖的抗氧化活性和相關(guān)理化性質(zhì)。
　　 實驗結(jié)果表明:
　　 1、EPC和EPL除蛋白后的組分DEPC和DEPL,經(jīng)DEAE-52柱層析后,以苯酚-硫酸法檢測,作出洗脫曲線,均取前三個組分,記作

3、DEPC1、DEPC2、DEPC3、DEPL1、DEPL2和DEPL3;
　　 2、DEPL的三個組分的糖含量和蛋白質(zhì)含量的差別要比DEPC的三個組分的含量要明顯,其中以DEPL1含糖量最高為89.7％,而蛋白含量最高的是DEPL3為38.3％;
　　 3、單糖組成分析,DEPC以半乳糖含量最高,而DEPL的甘露糖含量最高,DEPC3和DEPL3的甘露糖含量分別達(dá)到49.8％和49.6％;
　　 4、各多糖組分羥

4、基自由基清除活性大小,EPL＞EPC＞DEPL＞DEPC,DEPC3＞DEPC2＞DEPC1,DEPL3＞DEPL2＞DEPL1;
　　 5、各多糖組分DPPH自由基清除活性大小,EPL和DEPL活性相差不大,均強于EPC和DEPC,DEPC2＞DEPC3＞DEPC1,DEPL3＞DEPL2＞DEPL1;
　　 6、各多糖組分的IC50值,在羥基自由基和DPPH自由基的清除實驗中,DEPC和DEPL的純化組分,DEPL3

5、具有最小的IC50值;
　　 7、Sephadex G-200純化,6個經(jīng)DEAE-52分離提純的組分再經(jīng)SephadexG-200純化,根據(jù)其洗脫曲線發(fā)現(xiàn)6個多糖組分分子量分布比較單一;
　　 8、對經(jīng)Sephadex G-200純化后的多糖組分進(jìn)行分子量測定發(fā)現(xiàn)胞外多糖組分的分子量并不是很高,重均分子量MW范圍從29 Kda到41 Kda,且分子量分散度均不超過2。
　　 綜上結(jié)果表明,加入木質(zhì)纖維素的培養(yǎng)基