Lkb1信號(hào)通路在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)與表柔比星作用敏感性的研究.pdf

1、目的:研究Lkb1及其信號(hào)通路Lkb1-pAMPK(Thr172)-mTOR在肝細(xì)胞肝癌(HCC)組織和肝癌細(xì)胞中的表達(dá)，探索Lkb1信號(hào)通路與表柔比星作用敏感性的關(guān)系。
　　方法:
　　①采用免疫組織化學(xué)法檢測Lkb1、pAMPK-Thr172和pS6K-Thr389蛋白在51例肝癌組織(HCC)及對應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)。
　?、谂囵B(yǎng)人源性永生肝細(xì)胞系QSG7701、HCV NS3穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的惡性轉(zhuǎn)化肝細(xì)胞(pRcHCN

2、S3/QSG)和肝癌細(xì)胞株(Be17402、SMMC7721)，利用免疫細(xì)胞化學(xué)法和免疫蛋白印跡法檢測Lkb1、pAMPK-Thr172以及pS6K-Thr389蛋白表達(dá)。
　?、踦RcHCNS3/QSG、QSG7701、Be17402和SMMC7721中加入AMPK活性抑制劑Compound C抑制pAMPK-Thr172的表達(dá)后，通過免疫蛋白印記法檢測其抑制效果;同時(shí)采用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)(MTT)檢測Compound C處理和未處

3、理的4株細(xì)胞對表柔比星作用敏感性的變化。
　　結(jié)果:
　?、貺kb1和pAMPK-Thr172蛋白在HCC組織中陽性率(39.22％和27.45％)均明顯低于癌旁組織（98.04％和88.24％），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; pS6K-Thr389蛋白在HCC組織中的陽性表達(dá)率高于癌旁組織，分別為72.55％(37/51)和52.94％(27/51)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?、贚kb1、pAMPK-Thr172蛋白在pRc

4、HCNS3/QSG中表達(dá)低于QSG7701，且下游pS6K-Thr389蛋白表達(dá)高于QSG7701。
　　③應(yīng)用AMPK活性抑制劑Compound C處理后，pRcHCNS3/QSG、 QSG7701、 Be17402和 SMMC7721細(xì)胞中pAMPK-Thr172蛋白表達(dá)下調(diào)，pS6K-Thr389蛋白表達(dá)上調(diào);Compound C處理后，在相同的表柔比星濃度下，4株細(xì)胞的抑制率明顯地低于未處理組，表明細(xì)胞對表柔比星的作用敏感