攜帶掌葉半夏凝集素基因的慢病毒研究.pdf

1、浙江理工大學(xué)碩士畢業(yè)論文浙江理工大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明‘本人鄭重聲明：我恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。。Ⅱ?qū)W位論文作者簽名：日期：2012年2月15日浙江理工大學(xué)碩士畢業(yè)論文攜帶掌葉半夏凝集素基

2、因的慢病毒研究摘要fIIFIIIIIIIIIIflllllI[1Y2051722白血病(Leukemia)是一類常見的造血系統(tǒng)惡性疾病，很容易發(fā)生全身多臟器的轉(zhuǎn)移和浸潤，在我國有著很高的發(fā)病率和死亡率，嚴(yán)重危害人類的身體健康。目前白血病的治療手段還是以化療和骨麓移植為主，但多數(shù)患者只能獲得短暫的緩解，最終因復(fù)發(fā)或耐藥而死亡。掌葉半夏凝集素(PinelliaPedatisectaAgglutinin，PPA)是存在于中草藥掌葉半夏中的單子

3、葉甘露糖型植物凝集素，能特異性識別并結(jié)合甘露糖。其特有的糖結(jié)合特性可能為分析各種腫瘤細(xì)胞表面糖鏈結(jié)構(gòu)變化及對腫瘤惡化、遷移及預(yù)后等方面的研究提供有用的工具。慢病毒載體因其獨特的優(yōu)勢而成為繼簡單的逆轉(zhuǎn)錄病毒和腺病毒后較有前途的病毒載體。國內(nèi)外已經(jīng)對該類載體進(jìn)行了一系列的從基礎(chǔ)到臨床的研究。目前為止，HIV1型載體的實驗中均尚未發(fā)現(xiàn)野生型病毒的產(chǎn)生，提示其安全性是有保證的。目前關(guān)于掌葉半夏蛋白抗腫瘤的研究都是作為外用藥物，因此我們用慢病毒載

4、體攜帶PPA基因?qū)氚籽〖?xì)胞，并且對尸以基因殺傷白血病細(xì)胞的能力進(jìn)行了評估。本課題成功構(gòu)建了攜帶PPA基因的質(zhì)粒pWPXLPPA。采用第二代慢病毒載體系統(tǒng)，將載體質(zhì)粒pWPXLPPA與包裝質(zhì)粒pSPAX2及包膜質(zhì)粒pMD2G共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，成功包裝出了攜帶刪基因的目的慢病毒以及不帶外源基因的對照慢病毒，分別將其命名為LVPPA和LV。結(jié)果發(fā)現(xiàn)對照慢病毒能夠高效率的感染多種人白血病細(xì)胞株及其它多種癌細(xì)胞株，表明該課題所包裝出的慢病毒