白蕓豆中減肥藥物α-淀粉酶抑制劑的提純及其性質(zhì)研究.pdf

1、α-淀粉酶抑制劑(α-AI)是一種糖苷水解酶抑制劑。從白蕓豆中分離純化的α-淀粉酶抑制劑在醫(yī)藥及農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等方面具有廣泛地實(shí)用價(jià)值，尤其在減肥和治療糖尿病方面有突出的優(yōu)點(diǎn)。本文以白蕓豆為原料，以α-淀粉酶抑制劑為研究對(duì)象，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)白蕓豆中α-淀粉酶抑制劑的提取、分離純化以及其性質(zhì)、提取下腳料豆渣的綜合利用等進(jìn)行了相應(yīng)的研究，并取得了以下成果：
　　 ⑴確定了對(duì)白蕓豆中分離純化的α-淀粉酶抑制劑的DNS比色法最佳條件，作為α-淀粉

2、酶抑制劑活性測(cè)定的實(shí)驗(yàn)分析方法；
　　 ⑵在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn)，確定最佳浸提工藝條件為：取過(guò)60目篩的白蕓豆籽粒粉碎原料100g，按料液比(W/V)1:6加入1.5％NaCl溶液浸提過(guò)夜，離心(10000rpm，20min4℃)取上清70℃水浴15min，冷至室溫后離心，上清液加70％乙醇4℃醇沉。并進(jìn)行驗(yàn)證，α-淀粉酶抑制劑粗品抑制活性均值65％(n=3)；
　　 ⑶對(duì)浸提工藝獲得的α-淀粉酶抑

3、制劑粗品進(jìn)行DEAE-Cellulose離子交換樹(shù)脂柱層析洗脫，獲得α-淀粉酶抑制劑樣品得率0.37％，抑制活性79.3％；Sephadex G-75凝膠柱層析進(jìn)一步分離純化，α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)品，得率0.12％，抑制活性90.4％；
　　 ⑷采用PAGE凝膠電泳的考馬斯亮藍(lán)染色和麝香草酚法染色，以及Sepharose CL-6B凝膠柱層析，結(jié)果表明白蕓豆α-淀粉酶抑制劑樣品的相對(duì)分子量為36kD，且為結(jié)構(gòu)均一的糖蛋白，與文獻(xiàn)報(bào)

4、道基本吻合；
　　 ⑸分別采用Lowry法(又稱Folin-酚試劑法)和苯酚-硫酸法對(duì)樣品蛋白質(zhì)和多糖的含量進(jìn)行測(cè)定。參照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可得出白蕓豆α-淀粉酶抑制劑樣品的蛋白質(zhì)含量為86.7％，多糖含量為13.3％。
　　 ⑹白蕓豆中α-淀粉酶抑制劑樣品對(duì)溫度、pH、預(yù)溫時(shí)間的穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示α-淀粉酶抑制劑耐熱性較高，具有很高的應(yīng)用價(jià)值；當(dāng)pH4.5時(shí)抑制活性相對(duì)最大；
　　 ⑺白蕓豆α-淀粉酶抑制劑對(duì)哺乳