白蕓豆中α-淀粉酶抑制劑糖蛋白的提取純化、組成結(jié)構(gòu)及生物活性研究.pdf

1、本文采用現(xiàn)代分離純化技術(shù)從白蕓豆中分離提取得到單一組分的α-淀粉酶抑制劑(α-AI)糖蛋白，對其生物學(xué)性質(zhì)、超濾提取工藝、生物降糖、降脂活性及結(jié)構(gòu)與功能之間的構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。 采用柱色譜分離技術(shù)從白蕓豆中分離得到單一組分的α-AI，其為相對分子量為36000 Da的糖蛋白，對豬胰α-淀粉酶具有較高的抑制活性，抑制類型呈非競爭性抑制。白蕓豆α-Al糖蛋白對溫度、pH具有較高的穩(wěn)定性。 白蕓豆α-AI糖蛋白中蛋白質(zhì)

2、含量占88.2％，蛋白質(zhì)中含有17種常見氨基酸，其中天冬氨酸、谷氨酸、絲氨酸和蘇氨酸占有較高的比例；糖鏈中單糖組成為甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖，其摩爾比為2.42：1.50：1.52：1.00，糖鏈中單糖殘基以α-糖苷鍵連接。糖蛋白中蛋白質(zhì)和糖鏈的連接方式為O-糖肽鍵。構(gòu)效關(guān)系研究結(jié)果表明α-AI糖蛋白中單獨的糖鏈和蛋白鏈都沒有生物活性，只有糖鏈和蛋白鏈結(jié)合在一起形成完整的糖蛋白時，才對豬胰α-淀粉酶具有抑制活性。 分別采用有

3、機(jī)膜超濾和無機(jī)膜超濾對白蕓豆提取液中α-Al糖蛋白的濃縮提取工藝進(jìn)行了對比研究。結(jié)果表明截留分子量為10000 Da的有機(jī)超濾膜更適合白蕓豆中a-AI糖蛋白的分離濃縮。其最佳工藝條件為操作壓力0.8 MPa，物料質(zhì)量分?jǐn)?shù)7％(1:15)，物料溫度35℃，物料pH為自然pH。在此條件下，其穩(wěn)定膜通量為35.6 L/m2 h，體積濃縮倍數(shù)為8.3倍，多糖的截留率為20.1％，蛋白質(zhì)的截留率為72.7％，活性物質(zhì)收率為80.6％。 對