調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在原發(fā)性肝癌免疫逃逸中的作用初探.pdf

1、以往的研究已表明：癌癥患者在腫瘤局部和全身的免疫功能都處于耐受或缺陷狀態(tài)，腫瘤必需在逃逸機(jī)體的免疫監(jiān)控之后才得以發(fā)展。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是一類具有免疫調(diào)節(jié)功能的T淋巴細(xì)胞亞群，這類細(xì)胞具有很強(qiáng)的免疫抑制功能，從而在腫瘤免疫逃逸中起著十分重要的作用。雖然調(diào)節(jié)性T細(xì)胞有多種類型，但是經(jīng)典的CD4+CD25+FoxP3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(簡稱Treg細(xì)胞)是其中最主要的一群細(xì)胞。本研究以原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌(簡稱肝癌)這一本地區(qū)高發(fā)的惡性腫瘤為研究模型，通

2、過檢測肝癌患者外周血和腫瘤局部Treg細(xì)胞的數(shù)量、分布、表型及其抑制免疫的能力，同時(shí)結(jié)合體外模擬腫瘤微環(huán)境來進(jìn)一步探究Treg細(xì)胞在腫瘤部位聚集的機(jī)制，來揭示Treg細(xì)胞在肝癌免疫逃逸中的作用和機(jī)制。研究結(jié)果表明，肝癌患者外周血中的Treg細(xì)胞的比例明顯高于健康人外周血，而在同一患者中腫瘤組織中的Treg細(xì)胞比例也確實(shí)比對應(yīng)的癌旁組織或正常肝臟中高的多。而且，患者腫瘤組織中的Treg細(xì)胞具有更顯著的免疫抑制表型，在經(jīng)分離培養(yǎng)后能抑制肝癌

3、組織中的CD4+CD25-T細(xì)胞的增殖和激活。與這一結(jié)果相應(yīng)的是，腫瘤組織中CD8+T細(xì)胞和CD56+ NK細(xì)胞大多處于免疫耐受狀態(tài)。免疫組化檢測肝癌組織中Treg細(xì)胞數(shù)量的結(jié)果表明：在經(jīng)施行根治性肝切除術(shù)后的患者癌巢中Treg細(xì)胞的數(shù)量與其術(shù)后的預(yù)后生存成負(fù)相關(guān)，并可以作為一個(gè)獨(dú)立的預(yù)后判斷指標(biāo)。重要的是，我們還發(fā)現(xiàn)腫瘤臨床分級、癌巢中巨噬細(xì)胞的數(shù)量與Treg細(xì)胞的數(shù)量成正相關(guān)。小鼠模型的研究結(jié)果證明了去除肝內(nèi)巨噬細(xì)胞能抑制由于接種肝

4、癌引起的Treg細(xì)胞比例的上調(diào)。體外實(shí)驗(yàn)表明肝癌細(xì)胞株培養(yǎng)上清與PBMC共培養(yǎng)能引起Treg細(xì)胞比例的上調(diào)。此外，我們利用已建立的模擬腫瘤微環(huán)境的體外模型，在正常人外周血單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞分化的過程中加入肝癌細(xì)胞株培養(yǎng)上清，再將后者與自體淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)，也能夠引起Treg細(xì)胞比例的升高，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)IL-10參與了這一過程。我們實(shí)驗(yàn)室在前期研究中發(fā)現(xiàn)：用肝癌細(xì)胞株上清誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化成的巨噬細(xì)胞以及體內(nèi)癌巢部位的巨噬細(xì)胞都能產(chǎn)生IL-10

5、。這些結(jié)果提示腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞能通過IL-10引起局部Treg細(xì)胞比例的升高。鑒于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在肝癌免疫逃逸中所起的重要作用，我們對細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷(CIK)細(xì)胞在回輸前進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)測時(shí)觀察了FoxP3+細(xì)胞表達(dá)的情況，在多批次細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)含有較高比例的FoxP3+細(xì)胞，因此，我們通過優(yōu)化培養(yǎng)條件，降低了FoxP3+細(xì)胞的數(shù)量，為今后的臨床研究作好準(zhǔn)備。上述結(jié)果提示，Treg細(xì)胞在原發(fā)性肝癌免疫逃逸中發(fā)揮了重要的作用，在作為針對肝癌的治療