長循環(huán)靶向載絲裂霉素殼聚糖納米粒的制備和藥效學(xué)研究.pdf

1、目前惡性腫瘤已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人類健康的重大疾病,而化療藥物普遍存在抗腫瘤選擇性差和毒副作用大的缺點,導(dǎo)致治療效果不理想,給患者帶來極大的痛苦。因此,如何提高腫瘤患者的生活質(zhì)量,如何提高抗腫瘤藥物的靶向性及其治療效果成為腫瘤治療的首要命題。葉酸(FA)與其受體的結(jié)合具有一定的特異性和選擇性。近年來,利用葉酸受體在某些腫瘤部位的表達(dá)遠(yuǎn)高于其在正常組織的表達(dá)的特性,形成了一種葉酸修飾的靶向給藥系統(tǒng),這種抗腫瘤傳遞機(jī)制倍受廣大科研工作者的親睞。

2、納米給藥系統(tǒng)由于其可以控制釋放藥物而引起廣泛關(guān)注,其中具有良好生物相容性、生物可降解性的殼聚糖是常用的載體材料。另外,聚乙二醇(PEG)是一種親水性高分子,用于修飾給藥系統(tǒng)后能增加體內(nèi)循環(huán)時間。
　　 本研究目的在于開發(fā)一種穩(wěn)定、粒徑可控的納米粒,并對其進(jìn)行葉酸和PEG功能化修飾,載藥后使其成為一種安全、長循環(huán)、可主動靶向腫瘤組織的抗腫瘤給藥系統(tǒng)。主要內(nèi)容包括：⑴采用雙交聯(lián)法即離子交聯(lián)法結(jié)合化學(xué)交聯(lián)法制備粒徑可控、穩(wěn)定性較好的殼

3、聚糖納米粒子,考察多聚磷酸鈉與殼聚糖的質(zhì)量比、反應(yīng)時間和pH值對納米粒子粒徑的影響；研究戊二醛投入量對納米粒子形態(tài)和表面氨基數(shù)量的影響。⑵通過活化葉酸(FA)改性PEG修飾納米粒子,使其具有主動靶向和長循環(huán)的特性,通過紅外光譜法進(jìn)行結(jié)構(gòu)驗證；最后接枝絲裂霉素(MMC),并考察其體外釋藥特性。⑶通過細(xì)胞毒性試驗(MTT),激光共聚焦熒光顯微鏡觀測和對荷瘤小鼠的腫瘤抑制率試驗,驗證FA-PEG修飾的殼聚糖納米粒子的靶向性、長循環(huán)性以及對腫瘤

4、的抑制作用。⑷通過藥代動力學(xué)實驗,研究FA-PEG修飾的殼聚糖載藥納米粒子在大鼠體內(nèi)的動態(tài)代謝特征。研究表明：①利用雙交聯(lián)法成功制備出粒徑可控在200～500nm,性能穩(wěn)定的殼聚糖納米粒子。②經(jīng)FA和PEG共同修飾,并載有絲裂霉素的殼聚糖納米粒子,其載藥量為9.73％、包封率為21.58％,體外釋藥行為呈現(xiàn)速釋和緩釋的雙相特征。③MTT結(jié)果顯示FA-PEG修飾的殼聚糖載藥納米粒子具有較高的細(xì)胞毒性,并隨著時間的延長,細(xì)胞毒性逐漸增加。激

5、光共聚焦試驗結(jié)果也表明:FA修飾能增加粒子被He/Ta細(xì)胞攝取的能力。而體內(nèi)抑瘤率試驗結(jié)果顯示:載藥納米粒子與原料藥的抑瘤率相似,達(dá)到31.4％,但是FA-PEG修飾的載藥納米粒子能顯著降低藥物的全身毒副作用。④藥代動力學(xué)試驗結(jié)果顯示:FA-PEG修飾的殼聚糖載藥納米粒子的藥-時曲線下面積(AUC)、表觀分布容積(Vd)和半衰期(t1/2)均大于MMC注射劑,而且其總清除率(CL)小于MMC注射劑。說明MMC制備成納米粒后,具有一定的緩