三氯化鋁抑制大鼠成骨細(xì)胞功能的BMP-Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制.pdf

1、以體外培養(yǎng)SD大鼠乳鼠顱骨成骨細(xì)胞(OB)為研究對象，傳代培養(yǎng)至第3代，經(jīng)鑒定后，在培養(yǎng)體系中分別添加終濃度為0 mg/mL（對照組）、0.063 mg/mL（低劑量組）、0.126mg/mL（中劑量組）、0.252 mg/mL（高劑量組）三氯化鋁(AlCl3·6H2O)，染鋁24 h。采用實時熒光定量PCR檢測OB內(nèi)BMP-2、BMPR-Ⅰ A、BMPR-Ⅱ、Runx2、Osterix、COL-I、ALP和BGP mRNA表達(dá)水平，W

2、estern blot檢測OB細(xì)胞內(nèi)BMP-2和p-Smad1/5/8、細(xì)胞膜上pBMPR-Ⅰ A及細(xì)胞核內(nèi)Runx2和Osterix蛋白表達(dá)水平，免疫共沉淀方法檢測OB細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核內(nèi)Smad1/5/8/4復(fù)合物蛋白表達(dá)水平。旨在研究鋁抑制OB功能的BMP/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，結(jié)果表明:
　　(1)染鋁組OB細(xì)胞內(nèi)BMP-2 mRNA及蛋白表達(dá)水平和p-Smad1/5/8蛋白表達(dá)水平、BMPR-A和BMPR-mRNA表達(dá)水平、

3、細(xì)胞膜上pBMPR-A蛋白表達(dá)水平及細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)Smad1/5/8/4復(fù)合物蛋白表達(dá)水平顯著低于CG(p＜0.01)。表明鋁抑制OB的BMP/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。
　　(2)染鋁組OB細(xì)胞核中Runx2和Osterix mRNA及蛋白表達(dá)量顯著低于CG(P＜0.01)。表明鋁抑制OB核轉(zhuǎn)錄因子活性。
　　(3)染鋁組OB中COL-I、ALP和BGP mRNA表達(dá)顯著低于CG（P＜0.01）。表明鋁抑制OB功能。