WAVE1在K562白血病細(xì)胞侵襲中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1(WASP-family verprolinhomologous protein1，WAVE1)為近年來發(fā)現(xiàn)的新型肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白，在肌動蛋白聚合和細(xì)胞骨架重排中發(fā)揮重要作用。近年研究發(fā)現(xiàn)WAVE1在人類血液系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞株中高表達(dá)。我們前期研究中發(fā)現(xiàn)WAVE1在兒童急性白血病患兒骨髓單個核細(xì)胞中高表達(dá)，并且與白血病病程相關(guān)，但其參與白血病致病的機(jī)制尚不清楚。已有研究發(fā)現(xiàn)了WAVE蛋白家族參與了實體腫瘤細(xì)胞

2、的侵襲轉(zhuǎn)移，但WAVE1是否參與與白血病細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移尚不清楚。 本研究首先利用包含84個重要腫瘤通路基因的SuperArray PCR基因芯片研究了轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-WAVE1質(zhì)粒后高表達(dá)WAVE1的白血病K562細(xì)胞系，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染后基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)、整合素B3(Integrin，beta3)等與腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因表達(dá)明顯上調(diào)。提示W(wǎng)AVE1可能參與了腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移。

3、 接著以表達(dá)上調(diào)最明顯的MMP-2為研究對象發(fā)現(xiàn)：轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-WAVE124h及48h后K562細(xì)胞MMP-2 mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào)，而轉(zhuǎn)染W(wǎng)AVE1 siRNA24h及48h后K562細(xì)胞MMP-2 mRNA及蛋白水平明顯下調(diào)。說明WAVE1可能參與了MMP-2表達(dá)的調(diào)控。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)WAVE1促進(jìn)了K562細(xì)胞絲裂原激活的的蛋白激酶(MAPK)通路的細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERKI/2)的磷酸化，WAVE1可能通過

4、這一途徑影響MMP-2的表達(dá)。 通過免疫熒光技術(shù)發(fā)現(xiàn)WAVE1與MMP-2在K562細(xì)胞的細(xì)胞膜上存在共定位。 最后利用transwell方法檢測了WAVE1表達(dá)對K562細(xì)胞侵襲能力的影響，發(fā)現(xiàn)與對照組K562細(xì)胞相比轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-WAVE1后細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng)，而轉(zhuǎn)染W(wǎng)AVEl siRNA干擾WAVE1表達(dá)后K562細(xì)胞侵襲能力減弱。 綜上，本研究證明了WAVE1參與了K562白血病細(xì)胞侵襲的過程，其機(jī)