WAVE1、PDGFR-β在兒童急性白血病的表達(dá)及其關(guān)系探討.pdf

1、目的：白血病是我國(guó)兒童和青少年最常見(jiàn)的惡性疾病，揭示兒童急性白血病的發(fā)病機(jī)制，對(duì)于防治兒童白血病具有非常重要的意義。同其它惡性腫瘤一樣，兒童急性白血病的發(fā)生也是多因素參與，確定兒童急性白血病常見(jiàn)的致病基因，將其定位、分離，并研究其生物學(xué)功能成為兒童白血病研究中極其重要的方面。WAVEl(WASP-familyverprolinhomologousproteinl)為近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的新型肌動(dòng)蛋白調(diào)節(jié)蛋白，在肌動(dòng)蛋白聚合和細(xì)胞骨架重排中發(fā)揮重要

2、作用。近年研究發(fā)現(xiàn)WAVE1在人類血液系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞株中高表達(dá)。前期課題已經(jīng)發(fā)現(xiàn)WAVE1在兒童急性白血病患兒BMMCs中高表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)WAVE1與耐藥及抗凋亡作用密切相關(guān)，但其與白血病作用機(jī)制尚未完全明確。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)WAVEl和PDGFR-β在兒童急性白血病患者及HL-60、Raji細(xì)胞中的表達(dá)，探討WAVE1和PDGFR-β與白血病的關(guān)系，并研究二者之間是否存在調(diào)控關(guān)系。
　　 方法：收集急性白血病患者骨髓標(biāo)本，根據(jù)病程分為初

3、治組、復(fù)發(fā)組、緩解組，同時(shí)收集同期貧血查因患者骨髓標(biāo)本為對(duì)照組，提取骨髓單個(gè)核細(xì)胞，RT-PCR方法檢測(cè)WAVE1和PDGFR-p在mRNA水平的表達(dá)；培養(yǎng)HL-60、Raji細(xì)胞，分為轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-WAVEl組（轉(zhuǎn)染組）和轉(zhuǎn)染pcDNA3.1空載體組（對(duì)照組），轉(zhuǎn)染W(wǎng)AVElsiRNA組（干擾組）和轉(zhuǎn)染空干擾載體組（對(duì)照組），轉(zhuǎn)染48小時(shí)后收取細(xì)胞提取RNA和蛋白，分別以RT-PCR、WestemBlot方法在mRNA、蛋白水

4、平檢測(cè)WAVE1和PDGFR-β表達(dá)。
　　 結(jié)果：1.在急淋和急非淋中，與緩解組和對(duì)照組比較，初治組和復(fù)發(fā)組的WAVEl和PDGFR-p表達(dá)均顯著增高(P<0.05)；初治組和復(fù)發(fā)組比較及緩解組和對(duì)照組比較，WAVEl和PDGFR-β的表達(dá)無(wú)差異(P>0.05)。
　　 2.在mRNA水平，HL-60細(xì)胞、Raji細(xì)胞干擾組WAVEl表達(dá)明顯降低，而PDGFRβ表達(dá)分別為對(duì)照組的182％及141％；轉(zhuǎn)染組WAVE1相對(duì)

5、于對(duì)照組增加40％、55％，而PDGFRβ表達(dá)分別為對(duì)照組的54％、65％。
　　 3.在蛋白水平，HL-60細(xì)胞、Raji細(xì)胞內(nèi)干擾組WAVE1表達(dá)明顯降低，而PDGFRβ表達(dá)分別為對(duì)照組的157％及146％;轉(zhuǎn)染組WAVE1相對(duì)于對(duì)照組增加45％、54％，而PDGFRI3表達(dá)分別為對(duì)照組的59％、60％。
　　 結(jié)論：1.WAVE1和PDGFR-β在急性白血病的初治組、復(fù)發(fā)組高表達(dá)，緩解組低表達(dá)，并與病程相關(guān)。