羥基喜樹堿與甲氨蝶呤治療CIA模型大鼠的比較研究.pdf

1、背景： 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)的基本病理變化是自身免疫異常引起的致炎細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)等的釋放，以及由此而致的血管炎和滑膜炎。隨病情進展可出現(xiàn)滑膜、軟骨和骨質(zhì)的破壞[1]。RA滑膜增生和血管翳的形成，具有類似于“局部惡性腫瘤”的增生性和破壞性的特點，隨病情進展可出現(xiàn)滑膜、軟骨和骨質(zhì)的破壞。因此在治療RA的思路上有不少主張“效仿腫瘤的治療”方法，抑制滑膜組織增殖、誘導(dǎo)其凋亡成為治療RA的重要

2、途徑。是RA的治療思路的一個新創(chuàng)新。 目的： 通過觀察膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(collagen induced arthritis，CIA)大鼠的癥狀和血清中炎性細(xì)胞因子TNF—α、IL-1水平以及關(guān)節(jié)滑膜TUNEL染色的凋亡率，比較小劑量、大劑量羥基喜樹堿(HCPT)、甲氨蝶呤(MTX)的療效，得出何種治療效果更佳，探討HCPT在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療方面的潛在價值，為進一步研究提供科學(xué)依據(jù)。 方法： 1．成年Wi

3、star大鼠，多點皮內(nèi)注射牛Ⅱ型膠原和弗氏完全佐劑混合液，間隔三周腹腔注射加強免疫，誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎大鼠模型； 2．將32只CIA大鼠隨機分為4組，分別為B組(模型對照組)、C組(甲氨蝶呤2.0mg/kg/w治療組)、D組(小劑量羥基喜樹堿HCPT0.8mg/kg/w治療組)、E組(大劑量HCPT2.0mg/kg/w治療組)，另外A組為(空白對照組)； 3．ELISA法測定不同時點各組大鼠血清IL-1和TNF—α濃度。

4、 4．TUNEL凋亡染色15周大鼠的后肢膝關(guān)節(jié)滑膜，計數(shù)比較各組大鼠滑膜細(xì)胞凋亡率。 5．觀察不同時間點各組大鼠踝關(guān)節(jié)病理改變，并進行病理積分評定。 6．應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果： 1．模型成功率：根據(jù)模型大鼠的癥狀(包括大體觀、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、關(guān)節(jié)腫脹度)及病理學(xué)改變來評估。50只接受牛Ⅱ型膠原和弗氏完全佐劑混合液的大鼠，發(fā)生對稱性多關(guān)節(jié)炎的大鼠32只，模型成功率64％。 2

5、．關(guān)節(jié)腫脹度評價：初次免疫后關(guān)節(jié)紅腫進行性加重，關(guān)節(jié)炎指數(shù)(AI)與足腫脹度在6周左右達高峰，隨著時間的延續(xù)腫脹逐漸消退，進入慢性平臺期，逐漸出現(xiàn)關(guān)節(jié)強直、畸形以至功能障礙，導(dǎo)致行動不便。15周內(nèi)B、C、D、E組AI值與足腫脹度均高于A組(P＜0.05)，同時C組低于B組(P＜0.05)；15周內(nèi)C、D、E間均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05) 3．血漿TNF—α、IL-1濃度：CIA大鼠與正常大鼠相比，TNF—a、IL-1濃度在6周

6、左右達到高峰后逐漸下降；B、C、D、E組濃度水平均高于A組(P＜0.05)；C、D、E組均高于B組(P＜0.05)；C、D、E組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。各治療組作用相當(dāng)。 4.15周時點TUNEL染色檢測細(xì)胞凋亡計數(shù)結(jié)果：B、C、D、E組凋亡百分比均高于A組(P＜0.05)； C、D、E組均高于B組(P＜0.05)；C、D、E組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。各治療組作用相當(dāng)。 5．血漿TNF-α、IL-1濃度變