NF-kBp65 siRNA對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株Tac8113增殖、凋亡和耐藥的影響.pdf

1、中圖分類號(hào)：中圖分類號(hào)：R730.5；R739.8碩士學(xué)位論文NFNFkBp65kBp65siRNAsiRNA對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株Tac8113Tac8113增殖、凋亡和耐藥的影響增殖、凋亡和耐藥的影響院（系）、所院（系）、所基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院研究生姓名研究生姓名王云學(xué)科、專學(xué)科、專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)病理學(xué)與病理生理學(xué)導(dǎo)師姓導(dǎo)師姓名龔莉教授二Ο一三年四月年四月1NFκBp65siRNA對(duì)口腔鱗癌Tac8113細(xì)胞株增殖、凋亡和耐藥

2、的影響摘要目的：應(yīng)用siRNA干擾口腔鱗癌Tac8113細(xì)胞株內(nèi)NFκBp65基因的表達(dá)，同時(shí)聯(lián)合應(yīng)用化療藥物5Fu，觀察NFκBp65siRNA對(duì)口腔鱗癌Tac8113細(xì)胞株增殖、凋亡和耐藥的影響，擬為口腔鱗癌的靶向治療提供新思路。方法：體外培養(yǎng)Tac8113細(xì)胞，并分為三組：①空白對(duì)照組；②陰性對(duì)照組；③實(shí)驗(yàn)組。1.構(gòu)建NFκBp65siRNA，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染口腔鱗癌Tac8113細(xì)胞，應(yīng)用熒光顯微鏡觀察Tac8113細(xì)胞的轉(zhuǎn)染情況，并計(jì)

3、算細(xì)胞轉(zhuǎn)染率；2.應(yīng)用半定量RTPCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后對(duì)Tac8113細(xì)胞內(nèi)NFκBp65mRNA表達(dá)水平的影響；3.應(yīng)用ELISA法檢測(cè)轉(zhuǎn)染對(duì)Tac8113細(xì)胞內(nèi)NFκBp65蛋白表達(dá)水平的影響；4.應(yīng)用MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后對(duì)Tac8113細(xì)胞增殖的影響；5.應(yīng)用流式細(xì)胞儀（AnnexinVFITCPI法）檢測(cè)轉(zhuǎn)染后對(duì)Tac8113細(xì)胞凋亡的影響；6.轉(zhuǎn)染后將細(xì)胞分為未轉(zhuǎn)染組（空白對(duì)照組）和轉(zhuǎn)染組，聯(lián)合應(yīng)用不同濃度的化療藥物5Fu（0mgL

4、、16.35mgL、32.7mgL、327mgL、3270mgL、6540mgL），培養(yǎng)48h，觀察轉(zhuǎn)染后Tac8113細(xì)胞對(duì)化療藥物5Fu敏感性的影響。結(jié)果：1.應(yīng)用熒光標(biāo)記的NFκBp65siRNA轉(zhuǎn)染Tac8113細(xì)胞，轉(zhuǎn)染后24h，熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)多數(shù)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞胞核內(nèi)有綠色熒光信號(hào)存在，細(xì)胞轉(zhuǎn)染率約為61%；2.半定量RTPCR檢測(cè)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染后48h，空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)NFκBp65mRNA的相對(duì)表達(dá)量分