大鼠肺組織缺血再灌注損傷后HIF-1α與c-fos表達的相關(guān)性研究.pdf

1、目的: 通過建立肺缺血再灌注損傷（lung ischemic-reperfusion injury,LIRI）模型，觀察可溶性腫瘤壞死因子受體-Fc融合蛋白（soluble tumor necrosis receptor-Fc fusion protein,sTNFRI-Fc protein）對其對肺損傷的保護性作用效果，并觀察肺缺血再灌注中缺氧誘導因子-1α( hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)及c

2、-fos在大鼠肺缺血損傷中的作用機制，進一步探討sTNFRI-Fc 保護作用的深層機制和原理。
　　 方法: 150只Wistar大鼠不拘雌雄隨機分為三組，每組50只，I/R組（行左肺缺血再灌注損傷），CN組（假手術(shù)只開胸而不行左肺缺血再灌注損傷），TF組（行左肺缺血再灌注損傷后再靜脈給予可溶性TNFRI-Fc融合蛋白3μg/㎏），每組又分為0、1、2、4、8 h五個亞組。在呼吸機輔助下，開胸后I/R及TF組大鼠左肺門阻斷行缺血

3、45分鐘，開放左肺門再灌注作為缺血再灌注損傷模型。分別于缺血再灌注后0、1、2、4和8 h取材。實驗結(jié)束時摘取肺組織測肺組織濕/干重比值（W/D），制成組織勻漿測髓過氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛(MDA)含量。并留取肺組織采用組織病理學、組織芯片技術(shù)、免疫組織化學染色技術(shù)與圖象分析技術(shù)，觀察肺組織病理學改變、HIF-1α及c-fos的表達及灰度值變化。
　　 結(jié)果: 經(jīng)過缺血再灌注后，各實驗組的檢測指標呈

4、現(xiàn)明顯差異：與I/R組相比，TF組的病理組織學光鏡下肺泡破壞減少，出血，炎癥細胞浸潤明顯改善；SOD系統(tǒng)在TF組得到保護，破壞減少，與I/R組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，與CN組差異不明顯(p>0.05)；肺組織MPO及MDA在I/R組活力較余組明顯增強(P<0.01)，而CN組和TF組MPO活力相仿，無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。HIF-1α與c-fos的陽性表達位于肺泡上皮細胞胞核或胞漿，其表達強度肺再灌注組高于肺缺血再灌注行

5、可溶性TNFRI-Fc融合蛋白處理組與對照組。隨缺血再灌注時間的延長HIF-1α及c-fos表達增強，于4h時達最高峰。肺缺血再灌注組的表達強度高于肺缺血再灌注行可溶性TNFRI-Fc融合蛋白處理組正常對照組(P<0.05)。缺血再灌注后肺組織細胞凋亡的變化：與對照組比較I/R組與TF組在各時相點表達均增強，主要分布在肺泡上皮細胞的胞核，但TF組在各時相點表達均弱于I/R組。
　　 結(jié)論: 在體動物左肺阻斷/開放是經(jīng)典的肺臟缺血

6、再灌注損傷模型，本實驗亦證實其具有明確的實驗損傷效果；缺血再灌注時HIF-1α的應激性升高對于其適應缺血再灌注有重要意義，它在一定程度上直接影響細胞凋亡調(diào)控基因c-fos的變化。失代償?shù)慕Y(jié)果可能引起肺組織細胞凋亡異常增加，影響缺血再灌損傷時肺組織功能導致肺臟損傷?？扇苄訲NFRI-Fc融合蛋白對移植肺缺血再灌注損傷有顯著的保護作用，與其有效中和TNFα并阻斷其生物學活性有關(guān)。細胞凋亡與c-fos、HIF-1α表達強度的變化呈正相關(guān)(r分