版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白(簡(jiǎn)稱脂蛋白,Lipid-associated Membrane Proteins,LAMPs)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞發(fā)生凋亡的作用,初步探討其機(jī)制;研究迷迭香酸(Rosmarinic acid,RosA)對(duì)支原體LAMPs誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用,并初步探討其藥理機(jī)制。 方法:以支原體LAMPs損傷巨噬細(xì)胞為模型,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法求出支原體LAMPs作用于巨噬細(xì)胞所致凋亡的濃度和時(shí)間(IC5
2、0值),然后用DNA片斷化分析法觀察7.5mg/L LAMPs對(duì)巨噬細(xì)胞DNA降解的影響;吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)熒光染色觀察細(xì)胞形態(tài)的改變;RT-PCR、Western blot分別檢測(cè)LAMPs對(duì)巨噬細(xì)胞p53、Bcl-2和Bax mRNA和蛋白含量表達(dá)的影響。一些實(shí)驗(yàn)中還運(yùn)用了碘化丙啶(Propidium iodide, PI)染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率。 為了檢測(cè)支原體LAMPs或RosA對(duì)巨噬細(xì)胞作用的量效關(guān)
3、系,分別用1.25, 2.5, 5, 7.5, 10 和20 mg/L的LAMPs或25, 50, 100, 200 μmol/L的RosA作用細(xì)胞24小時(shí);同時(shí),為了檢測(cè)支原體LAMPs或RosA對(duì)巨噬細(xì)胞作用的時(shí)效關(guān)系,采用上述濃度的支原體LAMPs或RosA分別對(duì)細(xì)胞作用3、6、12、24、36、48小時(shí)。 結(jié)果:用不同劑量支原體LAMPs (1.25、2.5、5、7.5、10、20mg/L)孵育細(xì)胞24小時(shí)后,細(xì)胞存活率
4、隨藥物濃度的增加依次下降;7.5 mg/L支原體LAMPs孵育細(xì)胞24小時(shí)后,DNA呈典型的凋亡“梯帶”,p53表達(dá)呈濃度依賴性上調(diào),加入p53阻斷劑Pifithrin-α(30 μmol/L)后,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變,凋亡細(xì)胞減少,同時(shí)Bcl-2表達(dá)上調(diào),Bax表達(dá)下調(diào)。 MTT結(jié)果顯示100 μmol/L RosA具有最好的保護(hù)效果,用100 μmol/L RosA預(yù)處理細(xì)胞1小時(shí)后,再用7.5 mg/L支原體LAMPs孵育
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 雞毒支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白和GroEL蛋白誘導(dǎo)DF-1細(xì)胞釋放IL-1β的研究.pdf
- 肺炎支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白誘導(dǎo)人支氣管上皮細(xì)胞SPLUNC 1表達(dá)的變化.pdf
- 迷迭香酸抗谷氨酸誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡作用及機(jī)制的探討.pdf
- 迷迭香酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究.pdf
- 羊種布魯氏菌外膜蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡分子機(jī)制.pdf
- 肺炎衣原體感染對(duì)巨噬細(xì)胞內(nèi)ox-LDL源性脂質(zhì)蓄積的影響.pdf
- PPARδ激動(dòng)劑GW501516在oxLDL誘導(dǎo)THP-1源性巨噬細(xì)胞凋亡及脂質(zhì)蓄積中的作用.pdf
- 支原體巨噬細(xì)胞活化脂肽-2經(jīng)MAPKs途徑誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞表達(dá)MMP-9.pdf
- 發(fā)酵支原體和梨支原體誘導(dǎo)小鼠胸腺細(xì)胞凋亡與多器官損傷實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- β淀粉樣肽誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Tau蛋白抗凋亡的機(jī)制.pdf
- 丹參酚酸A對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生抗氧化、抗凋亡和抗炎的作用及其機(jī)制研究.pdf
- 脂氧素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞炎癥相關(guān)因子的影響及機(jī)制的研究.pdf
- 穿透支原體LAMPs通過(guò)激活NF-κB誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)iNOS和凋亡.pdf
- 雞毒支原體重慶分離株致病性及膜蛋白的初步研究.pdf
- 肺炎支原體感染誘導(dǎo)鼠脾淋巴細(xì)胞凋亡的研究.pdf
- 綿羊肺炎支原體膜蛋白的二維電泳及質(zhì)譜分析研究.pdf
- MicroRNA150在氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的THP-1源性巨噬細(xì)胞凋亡中的作用及機(jī)制.pdf
- 高游離脂肪酸所致巨噬細(xì)胞脂質(zhì)沉積的分子機(jī)制研究.pdf
- 解脲支原體體外抑制HeLa細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡及TLR2表達(dá)相關(guān)研究.pdf
- 腎上腺素對(duì)THP-1源性巨噬細(xì)胞脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論