2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:觀察支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白(簡(jiǎn)稱脂蛋白,Lipid-associated Membrane Proteins,LAMPs)誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞發(fā)生凋亡的作用,初步探討其機(jī)制;研究迷迭香酸(Rosmarinic acid,RosA)對(duì)支原體LAMPs誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用,并初步探討其藥理機(jī)制。 方法:以支原體LAMPs損傷巨噬細(xì)胞為模型,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法求出支原體LAMPs作用于巨噬細(xì)胞所致凋亡的濃度和時(shí)間(IC5

2、0值),然后用DNA片斷化分析法觀察7.5mg/L LAMPs對(duì)巨噬細(xì)胞DNA降解的影響;吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)熒光染色觀察細(xì)胞形態(tài)的改變;RT-PCR、Western blot分別檢測(cè)LAMPs對(duì)巨噬細(xì)胞p53、Bcl-2和Bax mRNA和蛋白含量表達(dá)的影響。一些實(shí)驗(yàn)中還運(yùn)用了碘化丙啶(Propidium iodide, PI)染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率。 為了檢測(cè)支原體LAMPs或RosA對(duì)巨噬細(xì)胞作用的量效關(guān)

3、系,分別用1.25, 2.5, 5, 7.5, 10 和20 mg/L的LAMPs或25, 50, 100, 200 μmol/L的RosA作用細(xì)胞24小時(shí);同時(shí),為了檢測(cè)支原體LAMPs或RosA對(duì)巨噬細(xì)胞作用的時(shí)效關(guān)系,采用上述濃度的支原體LAMPs或RosA分別對(duì)細(xì)胞作用3、6、12、24、36、48小時(shí)。 結(jié)果:用不同劑量支原體LAMPs (1.25、2.5、5、7.5、10、20mg/L)孵育細(xì)胞24小時(shí)后,細(xì)胞存活率

4、隨藥物濃度的增加依次下降;7.5 mg/L支原體LAMPs孵育細(xì)胞24小時(shí)后,DNA呈典型的凋亡“梯帶”,p53表達(dá)呈濃度依賴性上調(diào),加入p53阻斷劑Pifithrin-α(30 μmol/L)后,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變,凋亡細(xì)胞減少,同時(shí)Bcl-2表達(dá)上調(diào),Bax表達(dá)下調(diào)。 MTT結(jié)果顯示100 μmol/L RosA具有最好的保護(hù)效果,用100 μmol/L RosA預(yù)處理細(xì)胞1小時(shí)后,再用7.5 mg/L支原體LAMPs孵育

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