豬肺炎支原體MY-99株超微結(jié)構(gòu)、致病性及膜蛋白的研究.pdf

1、該研究對豬肺炎支原體MY-99株的超微結(jié)構(gòu)進行了研究,發(fā)現(xiàn)其菌體大小范圍為0.33-0.48um,缺乏細胞壁,菌體形態(tài)多樣.在對其致病性的研究中發(fā)現(xiàn),通過鼻腔接種豬肺炎支原體MY-99株2周后60﹪的試驗豬出現(xiàn)了喘氣等典型的豬地方流行性肺炎的臨床癥狀,其中2頭伴有輕度的咳嗽,病理切片可見到支氣管周圍有多量淋巴樣細胞浸潤,肺泡壁增厚等典型的間質(zhì)性肺炎的病變,這種病變程度在接種2周后和4周后較嚴(yán)重,6周后有所減輕,并且從試驗豬的肺臟中分離出

2、了豬肺炎支原體.同時發(fā)現(xiàn)試驗豬的平均日增重比對照豬顯著降低,接種后0-14天期間降低了31.05﹪(P<0.01),15-28天期間降低了42.01﹪(P<0.01),29-42天期間降低了0.1﹪(P>0.05),試驗豬血清中的抗體水平在2周后最高(1∶2<'4.2>),4周后降至1∶2<'3.9>,6周后最低(1∶2<'2.5>),顯示豬肺炎支原體MY-99株誘發(fā)了急性的豬地方流行性肺炎.采用0.4﹪TritonX-100結(jié)合KI提

3、取豬肺炎支原體MY-99株不同代次的傳代株MY-991、MY-993和復(fù)壯株MY-992的膜蛋白,并通過SDS-PAGE技術(shù)對其膜蛋白進行比較分析發(fā)現(xiàn),在人工培養(yǎng)條件下豬肺炎支原體MY-99株的膜蛋白發(fā)生了一定的變異,其中MY-991株的膜蛋白有七條蛋白條帶:94.4KD、57.5KD、46.0KD、36.0KD、32.4KD、20.4KD和16.6KD,MY-993株的膜蛋白有七條蛋白條帶:94.4KD、57.5KD、46.0KD、4

4、1.0KD、36.0KD、32.4KD和19.5KD,MY-992株的膜蛋白只有兩條蛋白條帶:46.0KD和32.4KD.用豬肺炎支原體MY-991、MY-992和MY-993的抗血清,以及豬肺炎支原體的標(biāo)準(zhǔn)陽性血清和標(biāo)準(zhǔn)陰性血清經(jīng)免疫印跡試驗對豬肺炎支原體MY-991、MY-993和MY-992株膜蛋白的抗原性進行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各菌株的P46能與上述所有血清(除陰性血清外)發(fā)生反應(yīng).將豬肺炎支原體MY-99株的P46電轉(zhuǎn)移至PVDF膜