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1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)及免疫印跡(Westernblot)技術(shù)聯(lián)合檢測(cè)Fibulin-2基因在乳腺癌組織與對(duì)應(yīng)癌旁正常乳腺組織、乳腺纖維腺瘤組織與對(duì)應(yīng)瘤旁正常乳腺組織之間的表達(dá)差異,從而評(píng)價(jià)Fibulin-2基因?qū)θ橄侔┣忠u、轉(zhuǎn)移和進(jìn)展的影響及其臨床意義。
方法:本實(shí)驗(yàn)共收集30例乳腺癌病人的乳腺癌組織與對(duì)應(yīng)的癌旁(≧3cm)正常乳腺組織標(biāo)本(乳腺癌組)以及32例乳腺纖維腺瘤病人的纖維腺瘤組織與對(duì)應(yīng)的瘤旁正常乳
2、腺組織標(biāo)本(乳腺纖維腺瘤組)。所有標(biāo)本在大體送常規(guī)病理學(xué)檢查后,其余組織立即置于冰上,然后迅速轉(zhuǎn)至-80℃冰箱儲(chǔ)存,其中一部分用與實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)Fibulin-2基因mRNA的表達(dá)差異,另一部分用于免疫印跡法(Westernblot)法檢測(cè)Fibulin-2蛋白的表達(dá)量差異。
結(jié)果:⑴乳腺癌組:癌旁組織Fibulin-2mRNA表達(dá)量為癌組織的6.149倍(P<0.05)。其中26例(86.7%)乳腺癌組織中的Fi
3、bulin-2mRNA表達(dá)水平比癌旁組織顯著下調(diào):下調(diào)10倍以上者15例,下調(diào)4倍以上者8例,下調(diào)2倍以上者3例。⑵乳腺纖維腺瘤組:乳腺纖維腺瘤組織與瘤旁正常乳腺組織中的Fibulin-2mRNA表達(dá)無明顯差異(P>0.05)。⑶經(jīng)免疫印跡法驗(yàn)證,Fibulin-2在蛋白水平和mRNA水平的變化趨勢(shì)基本一致。
結(jié)論:Fibulin-2mRNA和蛋白在乳腺癌中的表達(dá)較癌旁正常乳腺組織明顯減低,且與腫瘤分化程度有關(guān),提示Fibul
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