苯丁酸納對甲狀腺濾泡癌細(xì)胞侵襲能力的影響.pdf

1、重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文苯丁酸納對甲狀腺濾泡癌細(xì)胞侵襲能力的影響姓名：孫珂申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)內(nèi)分泌與代謝指導(dǎo)教師：劉純20090501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文室，中間有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室側(cè)鋪蓋基質(zhì)膠(Matrigel)，在上室放置CGTHW1細(xì)胞，下室加入3T3細(xì)胞(鼠成纖維細(xì)胞)上清液(具有腫瘤細(xì)胞趨化作用)，培養(yǎng)20一24h，當(dāng)下室底部出現(xiàn)穿過transwell上小孔的癌細(xì)胞時，對聚碳酸酯膜下室側(cè)癌細(xì)

2、胞進(jìn)行HE染色。在光鏡下計(jì)數(shù)穿過聚碳酸酯膜腫瘤細(xì)胞數(shù)，將5個視野的平均細(xì)胞數(shù)定義為腫瘤細(xì)胞的侵襲力。第四階段：將人甲狀腺癌CGTHW1細(xì)胞用不同濃度的苯丁酸鈉處理，細(xì)胞分組如下：對照組、4mmol／L組、6mol／L組。培養(yǎng)72h。免疫組化染色，光鏡下攝片，每組隨機(jī)測定5個視野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表達(dá)的強(qiáng)弱，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。第五階段：選用5份標(biāo)本，每份標(biāo)本同時培養(yǎng)2瓶，分對照組與實(shí)驗(yàn)組，對照組不加任何干預(yù)因素，實(shí)驗(yàn)組癌細(xì)胞

3、用終濃度為4mmol／L的苯丁酸鈉處理，培養(yǎng)72h。提取各組總RNA，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，取擴(kuò)增產(chǎn)物在1O％瓊脂糖凝膠中電泳，在紫外光下觀察攝片并測定光密度值，以每組5個視野的平均光密度值表示mRNA表達(dá)的強(qiáng)弱。結(jié)果：(1)苯丁酸鈉作用下CGTHW1細(xì)胞的浸襲能力降低(p005)。(2)苯丁酸鈉作用下，CGTHW1細(xì)胞中的MMP9、TIMP1蛋白的表達(dá)下降(pO05)。(3)苯丁酸鈉作用下，MMP9、T1MP1mRNA的表達(dá)要比對照組低(p