苯丁酸納對甲狀腺濾泡癌細胞侵襲能力的影響.pdf

1、重慶醫(yī)科大學碩士學位論文苯丁酸納對甲狀腺濾泡癌細胞侵襲能力的影響姓名：孫珂申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學內(nèi)分泌與代謝指導教師：劉純20090501重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文室，中間有聚碳酸酯膜相隔，在聚碳酸酯膜上室側鋪蓋基質(zhì)膠(Matrigel)，在上室放置CGTHW1細胞，下室加入3T3細胞(鼠成纖維細胞)上清液(具有腫瘤細胞趨化作用)，培養(yǎng)20一24h，當下室底部出現(xiàn)穿過transwell上小孔的癌細胞時，對聚碳酸酯膜下室側癌細

2、胞進行HE染色。在光鏡下計數(shù)穿過聚碳酸酯膜腫瘤細胞數(shù)，將5個視野的平均細胞數(shù)定義為腫瘤細胞的侵襲力。第四階段：將人甲狀腺癌CGTHW1細胞用不同濃度的苯丁酸鈉處理，細胞分組如下：對照組、4mmol／L組、6mol／L組。培養(yǎng)72h。免疫組化染色，光鏡下攝片，每組隨機測定5個視野的光密度，以其平均光密度值表示蛋白表達的強弱，進行統(tǒng)計學處理。第五階段：選用5份標本，每份標本同時培養(yǎng)2瓶，分對照組與實驗組，對照組不加任何干預因素，實驗組癌細胞

3、用終濃度為4mmol／L的苯丁酸鈉處理，培養(yǎng)72h。提取各組總RNA，進行逆轉(zhuǎn)錄反應，取擴增產(chǎn)物在1O％瓊脂糖凝膠中電泳，在紫外光下觀察攝片并測定光密度值，以每組5個視野的平均光密度值表示mRNA表達的強弱。結果：(1)苯丁酸鈉作用下CGTHW1細胞的浸襲能力降低(p005)。(2)苯丁酸鈉作用下，CGTHW1細胞中的MMP9、TIMP1蛋白的表達下降(pO05)。(3)苯丁酸鈉作用下，MMP9、T1MP1mRNA的表達要比對照組低(p