
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文檔簡介
1、目的:
研究PEG10對細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞系HTR-8/SVneo細(xì)胞侵襲能力的影響。
方法:
實(shí)驗(yàn)分為:
A:空白對照組;
B:下調(diào)空白載體組;
C:上調(diào)空白載體組;
D:PEG10慢病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)組;
E:PEG10慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)組。
分別轉(zhuǎn)染HTR-8/SVneo細(xì)胞,確定最適轉(zhuǎn)染條件和轉(zhuǎn)染效率;采用RT-PCR檢測各組PEG10基因的表達(dá)情況;We
2、stern blot法檢測各組PEG10蛋白的表達(dá)情況;應(yīng)用Transwell法檢測各組細(xì)胞侵襲能力的差異性。
結(jié)果:
熒光顯微鏡下觀察,在MOI=50∶1的條件下轉(zhuǎn)染效率可達(dá)94±2.31%;RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示PEG10慢病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)組和慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)組與對照組相比表達(dá)量明顯下降和升高,具有顯著差異,P<0.05;Transwell法檢測PEG10慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)組的細(xì)胞侵襲能力與對照組相
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