柴苓湯化學(xué)部位群對腎系膜細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討柴苓湯化學(xué)部位群包括柴苓小方和柴胡皂苷-d對大鼠腎小球系膜細(xì)胞(GMCs)異常增殖的影響及相關(guān)機(jī)制。 方法：采用脂多糖刺激系膜細(xì)胞異常增殖。MTT法檢測柴苓湯化學(xué)部位群對GMCs異常增殖的影響；免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測藥物作用后增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)；乳酸脫氫酶釋放實(shí)驗(yàn)檢測柴苓湯化學(xué)部位群的細(xì)胞毒作用。采用RT-PcR檢測藥物作用不同時(shí)間點(diǎn)后周期蛋白依賴性激酶抑制劑P21的表達(dá)。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測

2、定藥物作用后細(xì)胞外基質(zhì)Ⅳ型膠原和纖維連接蛋白的含量。明膠酶譜法測定基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2和MMP-9的活性變化。 結(jié)果：柴苓湯化學(xué)部位群可以劑量依賴性的抑制系膜細(xì)胞異常增殖并顯著減少PCNA陽性細(xì)胞數(shù)而沒有明顯的細(xì)胞毒作用。并且柴苓小方可以顯著地上調(diào)P21的表達(dá)。ELISA檢測結(jié)果證明柴苓湯化學(xué)部位群可顯著抑制Ⅳ型膠原和纖維連接蛋白的分泌；明膠酶譜法表明柴苓湯化學(xué)部位群可促進(jìn)MMP-2和MMP-9的活性和活性變化。 結(jié)