1，25-二羥維生素D-,3-和全反式維甲酸對(duì)卵巢癌細(xì)胞株HO8910生長(zhǎng)的協(xié)同抑制作用.pdf

1、目的：本課題通過(guò)單獨(dú)或聯(lián)合使用不同濃度的1，25-二羥維生素D3[1，25-di-hydroxy vitamin D3，1，25(OH)2D3]和全反式維甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株HO8910進(jìn)行誘導(dǎo)，研究其對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響，探討其作用的分子機(jī)制。 方法：選用人卵巢癌細(xì)胞株HO8910進(jìn)行體外培養(yǎng)，用不同濃度的1，25(OH)2D3和ATRA單獨(dú)或聯(lián)合

2、用藥處理后，采用MTT比色法測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率，采用流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry，F(xiàn)CM)進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的變化分析，采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)檢測(cè)維生素D受體(vitamin D receptor，VDR)及維甲酸α受體(retinoic acid receptorα，RARα)mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：

3、(1)MTT結(jié)果顯示，單獨(dú)或聯(lián)合使用不同濃度的1，25(OH)2D3和ATRA后的HO8910細(xì)胞生長(zhǎng)均受到抑制，與對(duì)照組細(xì)胞相比其生長(zhǎng)抑制率有顯著差異(P＜0.05)，其中聯(lián)合用藥組抑制率明顯高于單獨(dú)用藥組。(2)FCM結(jié)果顯示，1，25(OH)2D3和ATRA作用于HO8910細(xì)胞后均能引起細(xì)胞周期時(shí)相的改變(P＜0.05)，即G1期阻滯，同時(shí)G2、S期細(xì)胞比例下降；1，25(OH)2D3和ATRA均能誘導(dǎo)HO8910細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞凋

4、亡(P＜0.05)，并以聯(lián)合用藥組最為顯著。(3)RT-PCR結(jié)果顯示，單獨(dú)或聯(lián)合使用1，25(OH)2D3和ATRA后，H08910細(xì)胞的VDR及RARα mRNA的表達(dá)上調(diào)(P＜0.05)，并以聯(lián)合用藥組最為顯著。 結(jié)論：1，25(OH)2D3和ATRA均能抑制卵巢癌細(xì)胞H08910生長(zhǎng)，且有濃度和時(shí)間依賴性；能誘導(dǎo)細(xì)胞周期發(fā)生G1期阻滯，同時(shí)產(chǎn)生細(xì)胞凋亡作用；通過(guò)上調(diào)VDR及RARα mRNA的表達(dá)，從而抑制HO8910細(xì)