端粒酶激活和p16基因失活在NSCLC發(fā)病中的研究.pdf

1、目的：(1)探討端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)在非小細(xì)胞肺癌組織和正常肺組織中的表達(dá)及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶與非小細(xì)胞肺癌的組織學(xué)類型，分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤臨床分期之間的相關(guān)性。 (2)探討p16基因甲基化及其蛋白表達(dá)在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展過程中的作用，了解p16基因甲基化與蛋白表達(dá)的相關(guān)性。 (3)研究非小細(xì)胞肺癌組織中端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達(dá)與p16基因失活的相關(guān)性和p16基因狀態(tài)對端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶活性的影響。 方法：

2、(1)隨機(jī)選擇45例非小細(xì)胞肺癌組織和21例正常肺組織的新鮮手術(shù)切除標(biāo)本。 (2)利用實時熒光定量RT-PCR法、甲基化特異性PCR(MSP)法和免疫組化(SP)法分別檢測非小細(xì)胞肺癌組織和正常肺組織標(biāo)本的端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)，p16基因甲基化及其蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶hTERT mRNA在非小細(xì)胞肺癌組織的表達(dá)量為2.854±0.728，顯著高于正常肺組織2.042±0.378(P<0.0

3、1)；hTERT mRNA表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期密切相關(guān)(P<0.05)，與患者的性別、年齡、分化程度、病理類型無明顯相關(guān)(P>0.05)。 (2)p16基因甲基化率在非小細(xì)胞肺癌組織為57.8％，顯著高于正常肺組織14.3％(p<0.01)，p16基因蛋白表達(dá)陽性率在非小細(xì)胞肺癌為51.1％，顯著低于正常肺組織85.7％(p<0.01)。p16基因甲基化與非小細(xì)胞肺癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、分化程度有顯著相

4、關(guān)性(P<0.05)，與患者的組織學(xué)類型、臨床分期、年齡、性別無明顯相關(guān)(P>0.05)；p16蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織學(xué)分級、分化程度有顯著相關(guān)性(P<0. 05)，與患者的年齡、性別無明顯相關(guān)(P>0.05)；在非小細(xì)胞肺癌中p16基因甲基化與p16蛋白表達(dá)缺失存在顯著相關(guān)性(p<0．01)。 (3)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達(dá)與p16基因甲基化、p16基因蛋白表達(dá)缺失呈負(fù)性相關(guān)(p<0.01)。

5、 (4)p16基因失活組端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶陽性率72.7％，明顯高于未失活組17.4％(p<0.01)，p16基因正常組端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶陰性率明顯高于失活組(P<0.05)。 結(jié)論：(1)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達(dá)、p16基因失活在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。 (2)p16基因甲基化可能是導(dǎo)致非小細(xì)胞肺癌p16蛋白表達(dá)降低的一個重要機(jī)制。 (3)p16基因失活可以導(dǎo)致端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶激活，p16基因失活的不同狀態(tài)對