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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:檢測(cè)長(zhǎng)骨生長(zhǎng)正常﹑活躍﹑遲緩三種生長(zhǎng)狀態(tài)下,GPR30在長(zhǎng)骨生長(zhǎng)板中的表達(dá)情況,分析其表達(dá)在各生長(zhǎng)過(guò)程中的變化,探討GPR30在長(zhǎng)骨生長(zhǎng)過(guò)程中的作用。
方法:采用丙基硫氧嘧啶(PTU)誘導(dǎo)法構(gòu)建SD 雌鼠去甲減后追趕生長(zhǎng)模型組(B組)提供長(zhǎng)骨生長(zhǎng)活躍狀態(tài)與正常對(duì)照組比較(A組),切除幼鼠卵巢構(gòu)建去卵巢生長(zhǎng)模型組(D組)提供長(zhǎng)骨生長(zhǎng)遲緩狀態(tài)與去卵巢假手術(shù)組(C組)比較。測(cè)量各組大鼠脛骨及體重﹑尾長(zhǎng),取平均值作線形圖了解
2、各組大鼠的生長(zhǎng)趨勢(shì)。采用放射免疫法(RIA)檢測(cè)A組﹑B組大鼠血清T4水平及C組﹑D組大鼠血清E2水平用于比較激素水平變化。
于4W、8W、11W 齡分別處死各組雌鼠,取脛骨近端生長(zhǎng)板,經(jīng)甲醛固定、10%EDTA 脫鈣、脫水、包埋、切片后對(duì)各組各生長(zhǎng)階段切片行HE 染色大體觀察生長(zhǎng)板的形態(tài),Brdu 檢測(cè)生長(zhǎng)板軟骨細(xì)胞增生情況,SABC 免疫組化法標(biāo)記生長(zhǎng)板中GPR30的表達(dá),人工計(jì)數(shù)各生長(zhǎng)板中陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù),SPSS 軟
3、件分析比較GPR30在各組各階段生長(zhǎng)板中的表達(dá)差異。
結(jié)果:
1.脛骨長(zhǎng)﹑體重﹑尾長(zhǎng)在A組﹑C組維持穩(wěn)定快速增長(zhǎng);B組甲減期各指標(biāo)生長(zhǎng)速率明顯低于A組,甲減后生長(zhǎng)速率則高于A組同期大鼠的生長(zhǎng)速率;各指標(biāo)生長(zhǎng)速率在D組緩慢、平穩(wěn),低于C組。
2.4W 齡幼鼠血清T4水平B組較A組明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),8W齡二者血清T4水平相當(dāng),沒(méi)有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。8W 齡血清E2
4、水平D組較C組明顯下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)
3.各時(shí)期脛骨生長(zhǎng)板A組長(zhǎng)于B組,C組長(zhǎng)于D組,但在8W、11W 齡B組生長(zhǎng)板長(zhǎng)度明顯增加。8W 齡Brdu 標(biāo)記的陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)B組高于A組,C組高于D組。
4.在4W、8W、11W 時(shí),GPR30的表達(dá)在各生長(zhǎng)組中逐漸減少,應(yīng)用SPSS軟件分析得出,在B組生長(zhǎng)過(guò)程中GPR30 減少最顯著,其次為A組和C組,D組減少程度最輕。(A組,B組,C組,D組GP
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