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文檔簡介
1、目的:探討Rho相關(guān)卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil containing procrastinate2,Rock2)調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)對肝癌細胞侵襲遷移能力的影響。
方法:
1、用熒光定量PCR和Western blot法檢測30例肝癌組織及對應(yīng)癌旁組織中Rock2和MMP2的mRNA和蛋白表達,同時分析它
2、們之間的關(guān)聯(lián);
2、用熒光定量PCR和Western blot法觀察穩(wěn)定降低Rock2細胞中MMP2 mRNA及蛋白表達變化;
3、利用PCR定點突變技術(shù)構(gòu)建Rock2同義突變質(zhì)?!盎謴汀狈€(wěn)定干擾Rock2的肝癌細胞中Rock2表達后檢測MMP2蛋白表達變化;
4、采用Transwell侵襲實驗和劃痕實驗觀察空白對照組、穩(wěn)定低表達Rock2組、“恢復”Rock2組HepG2細胞侵襲和遷移能力變化。
3、 結(jié)果:
1、Rock2和MMP2蛋白在肝癌組織中均比對應(yīng)癌旁組織明顯增高,且兩者的表達呈正相關(guān)性。
2、穩(wěn)定降低肝癌細胞中Rock2的表達后發(fā)現(xiàn)MMP2的mRNA和蛋白表達也隨之降低;
3、“恢復”穩(wěn)定干擾Rock2的肝癌細胞中Rock2的表達,MMP2表達也“恢復”;
4、Rock2通過調(diào)節(jié)MMP2表達從而影響肝癌細胞的侵襲和遷移。
結(jié)論:在原發(fā)性肝癌細胞中降低Rock2可引起MMP
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