原發(fā)性肝癌細(xì)胞中Rock2調(diào)控MMP2對(duì)其侵襲遷移的作用.pdf

1、目的：探討Rho相關(guān)卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil containing procrastinate2,Rock2)調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)對(duì)肝癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響。
　　方法：
　　1、用熒光定量PCR和Western blot法檢測(cè)30例肝癌組織及對(duì)應(yīng)癌旁組織中Rock2和MMP2的mRNA和蛋白表達(dá)，同時(shí)分析它

2、們之間的關(guān)聯(lián)；
　　2、用熒光定量PCR和Western blot法觀(guān)察穩(wěn)定降低Rock2細(xì)胞中MMP2 mRNA及蛋白表達(dá)變化；
　　3、利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)構(gòu)建Rock2同義突變質(zhì)?！盎謴?fù)”穩(wěn)定干擾Rock2的肝癌細(xì)胞中Rock2表達(dá)后檢測(cè)MMP2蛋白表達(dá)變化；
　　4、采用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)觀(guān)察空白對(duì)照組、穩(wěn)定低表達(dá)Rock2組、“恢復(fù)”Rock2組HepG2細(xì)胞侵襲和遷移能力變化。
　

3、　結(jié)果：
　　1、Rock2和MMP2蛋白在肝癌組織中均比對(duì)應(yīng)癌旁組織明顯增高，且兩者的表達(dá)呈正相關(guān)性。
　　2、穩(wěn)定降低肝癌細(xì)胞中Rock2的表達(dá)后發(fā)現(xiàn)MMP2的mRNA和蛋白表達(dá)也隨之降低；
　　3、“恢復(fù)”穩(wěn)定干擾Rock2的肝癌細(xì)胞中Rock2的表達(dá)，MMP2表達(dá)也“恢復(fù)”；
　　4、Rock2通過(guò)調(diào)節(jié)MMP2表達(dá)從而影響肝癌細(xì)胞的侵襲和遷移。
　　結(jié)論：在原發(fā)性肝癌細(xì)胞中降低Rock2可引起MMP