生長(zhǎng)抑素對(duì)缺氧缺血性腦病時(shí)腸損傷的治療作用.pdf

1、目的： 本實(shí)驗(yàn)通過以SST干預(yù)HIBD大鼠后血液中D-乳酸、小腸絨毛的病理變化及回腸組織中P物質(zhì)(SP)的改變，探討SST對(duì)HIE腸損傷的治療作用，以期為臨床治療新生兒HIE腸損傷的有效方法和途徑提供理論依據(jù)。 方法： 1.動(dòng)物模型的制備將7日齡SD大鼠仰臥固定于操作板上，常規(guī)消毒切開頸部皮膚分離并結(jié)扎左頸總動(dòng)脈，縫合切口，后置于37℃恒溫水浴2.5L的密閉玻璃容器中(保持玻璃容器內(nèi)溫度約為34℃)，以1.5～2

2、.5L/min的速度通入濕化混合氣體(體積濃度8％氧氣：92％氮?dú)?，2h后恢復(fù)正常供氧。假手術(shù)組僅切開頸部皮膚，分離左頸總動(dòng)脈后不予結(jié)扎，縫合切口后不做低氧處理。空白組不予任何處理。 2.腹腔注射方法造模成功后約10分鐘直接抽取用生理鹽水稀釋為1ug/ml的SST溶液。左手抓住動(dòng)物，右手將注射針頭于左或右下腹刺入皮下，針頭向前推0.5到1.0cm，再以45°角穿過腹肌，固定后，緩慢注射溶液，按20ug/kg計(jì)量給藥。

3、3.行為能力檢查：分別于手術(shù)前及缺氧后對(duì)每只新生大白鼠進(jìn)行翻身能力、夾尾左旋測(cè)試。 4.腦大體及回腸形態(tài)檢查：分別于處死時(shí)觀察每只新生大鼠腦組織和回腸組織的大體形態(tài)。 5.血液中D-乳酸濃度，小腸絨毛高度及寬度的變化和回腸組織中SP測(cè)定：將7日齡SD大白鼠按照完全隨機(jī)法分成空白組(n=6)，sham術(shù)組(n=6)，HIE模型組(n=8)，SST治療組(n=8)。給予處理6小時(shí)后，各組新生大白鼠經(jīng)腹主動(dòng)脈取血測(cè)量血漿D-乳

4、酸，截取回腸組織經(jīng)IBA2000圖象分析系統(tǒng)測(cè)量小腸絨毛高度寬度并給予病理攝像，對(duì)回腸組織中的P物質(zhì)(substanceP，SP)進(jìn)行免疫組織染色以測(cè)量其濃度變化。 結(jié)果： 1.行為能力檢查術(shù)前每只大鼠均做翻身能力、夾尾左旋測(cè)定，28只全部正常。sham組測(cè)定結(jié)果同前。經(jīng)歷缺氧缺血的16只大鼠，9只不能翻身，2只出現(xiàn)夾尾左旋，3只表現(xiàn)不能翻身和夾尾左旋同時(shí)存在。 2.腸組織大體檢查新生大白鼠HIE后6小時(shí)回腸組織

5、的肉眼外觀與空白組比較可見明顯蒼白，水腫，而且體積增大，SST干預(yù)的治療組大白鼠未見上述改變或僅見輕微的水腫，假手術(shù)組和空白組大鼠未見任何病理變化。 3.腦大體檢查新生大白鼠HIBD后模型組的結(jié)扎側(cè)半球腦組織受損嚴(yán)重，在6h時(shí)即可出現(xiàn)明顯的蒼白、水腫，體積明顯大于對(duì)側(cè)，其中1例可看到結(jié)扎側(cè)大腦半球局部出現(xiàn)液化壞死灶；而SST干預(yù)組的大白鼠腦組織未見上述改變或僅見結(jié)扎側(cè)腦半球輕微的水腫；假手術(shù)組和空白組大鼠大腦半球左右對(duì)稱，未見任

6、何病理變化。 4.血液中D-乳酸濃度，小腸絨毛高度及寬度的變化和回腸組織中SP測(cè)定：模型組血漿D-乳酸水平顯著升高，回腸部分的小腸絨毛變粗變短，部分發(fā)生融合，數(shù)目減少，黏膜層及神經(jīng)纖維叢中的SP免疫組織化學(xué)染色陽性表達(dá)明顯增強(qiáng)，即平均光密度增高。與模型組相比較，SST治療組的血漿D-乳酸水平顯著下降，回腸段的小腸絨毛變細(xì)變高，數(shù)目顯著增加，黏膜層及神經(jīng)纖維叢中SP免疫組織化學(xué)染色表達(dá)顯著減弱。 結(jié)論： 1.新生大

7、鼠HIBD模型制作成功。 2.7日齡新生大白鼠HIBD后，不但行為能力出現(xiàn)異常，6小時(shí)后腸道組織肉眼觀出現(xiàn)明顯的蒼白水腫，體積增大。光鏡下，病理學(xué)觀察，可見回腸上皮細(xì)胞出現(xiàn)脫落壞死，且小腸絨毛數(shù)量減少，出現(xiàn)融合，絨毛變高變粗，血液中D-乳酸水平顯著升高，證明腸黏膜的屏障功能受損。腸黏膜層及神經(jīng)纖維叢SP增多，提示HIBD腸道損傷與炎癥反應(yīng)有關(guān)。 3.治療組治療組血漿D-乳酸水平下降，絨毛變細(xì)變高，數(shù)目增多，黏膜及神經(jīng)纖維