茶葉和中草藥的農(nóng)藥多殘留檢測方法與樣品制備新技術的研究.pdf

1、茶葉和中草藥是我國傳統(tǒng)的特色種植植物，在國內(nèi)外貿(mào)易中占據(jù)重要地位。但是，近年來，一些國家不斷提出和修訂針對茶葉和中草藥的農(nóng)藥殘留限量標準，形成貿(mào)易技術壁壘，嚴重影響和制約了我國茶葉和中草藥的國際貿(mào)易。 根據(jù)目前國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，茶葉、中草藥中農(nóng)藥殘留分析方法研究存在明顯不足，多數(shù)研究集中于單殘留或選擇性多殘留方法，缺少農(nóng)藥多殘留檢測方法和新技術的應用。對于分子印跡聚合物，從作為液相色譜固定相、選擇性催化劑到傳感器，均得到了廣泛的研

2、究，但以富集、凈化殘留農(nóng)藥為目標的研究，國際上也才處于起步階段。基于此，本文在以下幾方面開展研究工作：1.采用正交設計，研究基質固相分散萃取的制約因素，建立茶葉農(nóng)藥殘留的基質固相分散萃取方法；2.選擇目前大量種植的中草藥板蘭根、白芍為對象，研究建立簡便、快速的農(nóng)藥多殘留檢測方法；3.以常用農(nóng)藥為模板，研究合成分子印跡聚合物的方法，以合成的MIPs，制備SPE柱，研究MISPE的性能及應用技術；4.通過核磁共振、Scatchard分析等手

3、段，探討、揭示MIP的識別行為及機理。 主要研究結果如下： 1.綜述了農(nóng)藥殘留樣品制備技術研究進展，包括廣泛萃取溶劑體系、超聲波提取、基質固相分散萃取、微波輔助萃取、固相微萃取及固相萃取技術等；農(nóng)藥殘留檢測技術研究進展，包括氣相色譜、高效液相色譜及生物測定法等；茶葉、中草藥農(nóng)藥殘留檢測技術進展以及分子印跡聚合物的基本理論、制備技術及其在農(nóng)藥殘留檢測方面的應用進展等。 2.采用正交實驗設計，評價了固相填料種類、用量

4、、活性炭、淋洗劑及樣品水分含量等對茶葉中有機磷農(nóng)藥基質固相分散方法的影響，結果表明，對于不同農(nóng)藥，各因素的影響主次存在差異。在正交實驗結果的基礎上，以解決極性較強的農(nóng)藥回收率為目標，提出了優(yōu)化的茶葉有機磷農(nóng)藥基質固相分散萃取方法，在茶葉中的添加回收實驗結果表明，方法的回收率和相對標準偏差均能滿足農(nóng)藥殘留分析要求，可以用于茶葉有機磷農(nóng)藥的殘留檢測。 3.建立了茶葉中59種農(nóng)藥殘留GC-MS快速篩選、確證及定量的系統(tǒng)分析方法。對59

5、種農(nóng)藥應用基質固相分散萃取及GC-MS測定程序，確定了優(yōu)化的GC-MS檢測方式及應用EI-SIM方式檢測時59種農(nóng)藥的選擇離子，方法具有同時進行快速篩選和準確確證能力，提高了檢測效率。添加回收實驗及實際樣品檢測均表明，建立的方法對59種農(nóng)藥添加回收率及精密度實驗均符合殘留農(nóng)藥分析的規(guī)定，各農(nóng)藥的LOQ滿足相關殘留限量標準要求。 4.建立了同時測定板蘭根藥材及其制劑中有機磷農(nóng)藥、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥及硫丹、三唑酮、乙烯菌核利等15種農(nóng)

6、藥殘留量的氣相色譜分析方法。待測農(nóng)藥殘留組分在優(yōu)化的前處理條件下能定量回收，方法的檢出限LOD為0.1～32.5μg/L，定量限LOQ為0.3～108.3μg/L，回收率在70.2％～119.5％之間，相對標準偏差RSD在1.4～18.9％之間。方法具有操作簡單、耗時少、靈敏度高和試劑消耗少等特點，能滿足實際檢測的需要。 5.研究提出中草藥中戊唑醇、氯苯嘧啶醇等6種農(nóng)藥殘留的MSPD-GC-NPD檢測方法，方法的準確度和精密度高

7、，簡單、快速，不需要特殊的儀器設備，有機溶劑用量僅10mL/樣，成本低，可以滿足實際樣品檢測要求。 6.采用正交實驗設計，評價了固相填料種類、用量及淋洗劑對中草藥有機磷農(nóng)藥殘留MSPD方法的影響，結果表明，對于不同農(nóng)藥，3個因素的影響主次存在差異，這與農(nóng)藥的極性或水溶性存在顯著的關系。在正交實驗結果的基礎上，以解決極性較強的農(nóng)藥回收率為目標，提出了優(yōu)化的中草藥有機磷農(nóng)藥基質固相分散萃取方法，在白芍和板蘭根中的添加回收實驗結果表明

8、，方法的回收率和相對標準偏差均能滿足農(nóng)藥殘留分析要求，可以用于中草藥有機磷農(nóng)藥的殘留檢測。 7.研究、建立了白芍、板蘭根中59種農(nóng)藥殘留GC-MS快速篩選、確證及定量的系統(tǒng)分析方法。對59種農(nóng)藥應用MSPD及GC-MS測定程序，方法具有同時進行快速篩選和準確確證能力，提高了檢測效率。添加回收實驗表明，對59種農(nóng)藥添加回收率及精密度均符合農(nóng)藥殘留分析的規(guī)定，各農(nóng)藥的檢測限滿足相關殘留限量標準要求。 8.分別以異丙隆、溴氰菊

9、酯和芐嘧磺隆為模板合成印跡聚合物，探討、研究其底物選擇性及結合機理。結果表明，以甲苯為溶劑，采用封管聚合法制備的三種農(nóng)藥分子印跡聚合物，對模板農(nóng)藥表現(xiàn)出高度選擇結合特性，對于結構相近的化合物具有吸附活性。通過核磁共振及Scatchard分析，揭示了識別機理。Scatchard分析表明，以異丙隆和芐嘧磺隆為模板制備的MIP分別具有兩類結合位點，而溴氰菊酯為模板的MIP僅有一類結合位點。 9.選擇取代脲類除草劑和擬除蟲菊酯類殺蟲劑代