Cdt1和Geminin在白血病細胞中的表達及細胞周期各時相分布.pdf

1、第一部分Cdt1和Geminin在Jurkat細胞中的表達 目的:為探討細胞復(fù)制允許因子Cdt1和復(fù)制抑制因子Geminin在白血病細胞中的表達。為白血病的發(fā)病機制、診斷治療和預(yù)后判斷提供依據(jù)。 方法:培養(yǎng)白血病細胞系Jurkat細胞，以處于對數(shù)生長期的Jurkat細胞作實驗組；以正常人外周血淋巴細胞作對照組。利用RT-PCR方法檢測細胞中Cdt1和Geminin mRNA的表達，進行半定量分析；利用流式細胞儀對細胞熒光

2、強度進行定量分析，以檢測細胞中的Cdt1和Geminin蛋白的表達。 結(jié)果: ①處于對數(shù)生長期的Jurkat細胞Cdt1 mRNA及蛋白表達顯著高于對照組。 ②處于對數(shù)生長期的Jurkat細胞Geminin mRNA及蛋白的表達顯著高于對照組。 結(jié)論: ①人T淋巴細胞性白血病細胞系Jurkat細胞，Cdt1的表達水平顯著增高，可能與白血病細胞惡性增殖有關(guān)。 ②人T淋巴細胞性白血病細胞系Ju

3、rkat細胞，Geminin的表達水平顯著增高，可能參與了白血病細胞惡性增殖。 第二部分Cdt1和Geminin在K562細胞周期各時相中的表達 目的:為探討細胞復(fù)制允許因子Cdt1和復(fù)制抑制因子Geminin在白血病細胞細胞周期各時相中的表達。 方法:培養(yǎng)白血病細胞系K562細胞，使用胸苷將細胞同步化。利用流式細胞儀檢測K562細胞同步率(用PI染色)。同時用流式細胞儀檢測細胞周期各時相細胞中的Cdt1和Gem

4、inin蛋白的表達，對細胞熒光強度進行定量分析。 結(jié)果: ①K562細胞被胸苷阻斷24h后，細胞蓄積在G1/S轉(zhuǎn)換期，釋放4h，細胞全部進入S期，釋放12h細胞絕大部分進入G2/M期，釋放24h，細胞重新恢復(fù)到對數(shù)生長期。 ②Cdt1和Geminin蛋白在.K562細胞周期各個時相均有表達。 ③各時相Cdt1和Geminin在蛋白水平表達有顯著差異在G1/S轉(zhuǎn)換期最低，在G2/M轉(zhuǎn)換期最高。 結(jié)論