PTK787對白血病K562細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及FKmRNA表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]
　　 通過研究酪氨酸激酶抑制劑(PTK787)對人慢性粒細(xì)胞白血病急變期細(xì)胞系K562細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期以及FAKmRNA表達(dá)的影響,探討FAK在髓系白血病發(fā)生發(fā)展中的作用,試圖在分子靶向水平尋找白血病治療新的思路。
　　 [方法]
　　 (1)體外培養(yǎng)白血病細(xì)胞株K562細(xì)胞,取對數(shù)生長期的細(xì)胞用于實驗研究。
　　 (2)應(yīng)用MTT法觀察PTK787對K562細(xì)胞增殖的影響。
　　 (

2、3)流式細(xì)胞術(shù)檢測PTK787對K562細(xì)胞周期的影響。
　　 (4)應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測PTK787作用前后K562細(xì)胞FAKmRNA表達(dá)水平的變化。
　　 [結(jié)果]
　　 (1)MTT法結(jié)果顯示:隨著PTK787濃度增加與作用時間延長,K562細(xì)胞的增殖抑制率逐漸升高。同一時間不同濃度組之間比較,或者同一濃度不同時間組之間比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。其中PTK787作用48小時,濃度320μ

3、mol/L對細(xì)胞抑制率最高,繼續(xù)增加濃度或延長作用時間抑制率增加不明顯。
　　 (2)流式細(xì)胞儀顯示:隨著PTK787濃度增加,G1期細(xì)胞比率逐漸升高,S期細(xì)胞比率逐漸下降,各組間比較有明顯差異(P＜0.05)。藥物濃度由160μmol/L繼續(xù)升高,K562細(xì)胞周期的G1期、S期改變不明顯。
　　 (3)RT-PCR技術(shù)檢測不同濃度PTK787對K562細(xì)胞FAKmRNA表達(dá)水平的影響,發(fā)現(xiàn)隨著PTK787濃度增加,K5

4、62細(xì)胞的FAKmRNA表達(dá)逐漸降低,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。藥物濃度由160μmol/L繼續(xù)升高,K562細(xì)胞FAKmRNA表達(dá)的改變亦不明顯。
　　 [結(jié)論]
　　 (1)PTK787對白血病K562細(xì)胞的增殖有抑制作用。
　　 (2)白血病K562細(xì)胞細(xì)胞處于S期比率高,PTK787可以降低S期細(xì)胞比率、阻止K562細(xì)胞周期由G1期向S期轉(zhuǎn)換。
　　 (3)髓系白血病存在FAK異常