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1、背景:克羅恩病(Crohn's disease,CD)是一種病因尚不十分清楚的胃腸道的慢性炎性肉芽腫性疾病。目前一致認(rèn)為其病因可能涉及多種因素,包括環(huán)境、遺傳、腸道感染和免疫因素。自從美國的Chiodini從克羅恩病患者體內(nèi)分離出的細(xì)菌染色體被證明含有副結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis,MAP)特異的DNA序列IS900(insection sequence 9
2、00)之后,對副結(jié)核分枝桿菌的致病作用的研究一直方興未艾。此后,相繼有研究報導(dǎo)從CD患者的腸道組織[1]、淋巴結(jié)[2]、母乳中[3]培養(yǎng)出MAP。盡管如此,副結(jié)核分枝桿菌的感染是否與克羅恩病的發(fā)病相關(guān)仍存在爭議。
目的:本研究擬采用巢式PCR的方法來檢測中國CD患者外周血中MAP特異的DNA序列IS900以及體外培養(yǎng)的方法來探討CD的發(fā)病與副結(jié)核分枝桿菌之間的相關(guān)性。
方法:本研究收集了浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸
3、夫醫(yī)院2011年8月至2012年3月間,經(jīng)臨床及腸鏡、病理確診的CD患者血樣標(biāo)本10例,健康人群血樣標(biāo)本14例作為正常對照組。通過巢式聚合酶聯(lián)反應(yīng)(nested polymearse chain reaction,nPCR)技術(shù)來檢測CD患者和健康人群血單核細(xì)胞層中MAP特異的插入序列IS900以及通過體外培養(yǎng)的方法檢測MAP。
結(jié)果:通過巢式PCR技術(shù)分別對10例CD患者和14例健康人群的血單核細(xì)胞層進(jìn)行檢測,均未檢測到
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