抗壞血酸過氧化物酶OsAPX2轉化大豆及耐旱功能分析.pdf

1、干旱脅迫是影響作物產量提高和品質改良重要限制因子，據(jù)統(tǒng)計每年由于干旱脅迫導致的作物產量損失約為其它非生物脅迫因子引起產量損失的總和。因此，發(fā)掘和利用植物耐旱基因，選育耐旱轉基因新品種（系）是解決這一問題重要途徑。本研究以水稻抗壞血酸過氧化物酶OsAPX2為轉化對象，將其轉入不同大豆品種，研究OsAPX2在轉基因大豆中的耐旱功能，并創(chuàng)制轉基因耐旱新種質，為今后選育耐旱轉基因大豆新品系（種）提供重要材料。主要研究結果如下:
　　1、利

2、用發(fā)根農桿菌遺傳轉化技術證實了OsAPX2能夠提高轉基因大豆毛狀根耐旱性。構建OsAPX2的GUS、GFP融合表達載體，并轉化發(fā)根農桿菌菌株K599，同時以pBI121-GUS、pCamA-GFP、pCambia3301-OsAPX2為對照，分別獲得了PCR檢測為陽性的轉基因大豆毛狀根;經GUS染色和熒光顯微觀察證實了融合基因OsAPX2∷GUS、OsAPX2∷GFP均能在大豆毛狀根正常表達，且轉基因毛狀根在干旱脅迫處理條件下的過氧化氫

3、(H2O2)、丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)含量的上升量顯著低于野生型，說明OsAPX2具有提高轉基因大豆毛狀根耐旱性功能。
　　2、利用根癌農桿菌遺傳轉化技術證實了OsAPX2具有提高轉基因大豆植株耐旱性的功能。利用根癌農桿菌轉化技術將OsAPX2轉化大豆品種，獲得了9個轉基因株系，實時定量PCR分析發(fā)現(xiàn)，9個轉OsAPX2株系的OsAPX2表達量存在較大差異，其中以L1、L2、 L33與L34株系表達量較高;分析9個轉Os

4、APX2大豆株系抗壞血酸過氧化物酶活性發(fā)現(xiàn)，以L1、L2、L33與L34株系過氧化物酶活性較高，與實時定量PCR結果一致;轉基因株系L33和L34在干旱脅迫處理條件下的H2O2、MDA、Pro含量上升量均較野生型低，而葉片相對含水量下降不顯著，說明OsAPX2具有提高轉基因大豆植株耐旱性的作用;分析L33、L34成熟期產量相關性狀發(fā)現(xiàn)，干旱脅迫條件下，轉基因株系部分產量相關性狀優(yōu)于野生型對照。
　　3、利用花粉管通道遺傳轉化技術獲