MMP-9與TIMP—1在肺缺血再灌注損傷大鼠肺泡巨噬細(xì)胞中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的: 根據(jù)Sekido法制備大鼠肺缺血—再灌注肺損傷動(dòng)物模型，從分子及基因水平觀察巨噬細(xì)胞源性MMP-9與TMIP-1在大鼠肺缺血—再灌注損傷早期的表達(dá)變化規(guī)律，探討其發(fā)病機(jī)制中的作用，為缺血—再灌注早期肺損傷治療提供一種新思路。 方法: 1．本課題實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用48只健康SD大鼠隨機(jī)分為六組，每組8只。制備肺缺血—再灌注模型，肺缺血45min組、再灌注30min組、再灌注60min組、再灌注120min組、再灌

2、注180min組，分別于缺血45min、再灌注30min、再灌注60min、再灌注120min、再灌注180min處死，留取左肺組織標(biāo)本，另設(shè)空白對(duì)照組。2．用37℃生理鹽水行支氣管肺泡灌洗、離心，用含10％小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)沉淀細(xì)胞。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)方法檢測(cè)MMP-9和TIMP-1mRNA的表達(dá)，采用夾心酶聯(lián)免疫法測(cè)定巨噬細(xì)胞源性MMP-9和TIMP-1蛋白表達(dá)量。并對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

3、 結(jié)果: 1．與對(duì)照組相比，缺血45min組、再灌注30、60、120min、180min組MMP-9mRNA表達(dá)和蛋白濃度明顯增加，有顯著性差異(P＜0．05)，再灌注120min組mRNA表達(dá)和蛋白濃度達(dá)到最高峰。 2．與對(duì)照組相比，缺血45min組、再灌注30、60、120min、180min組TIMP-1mRNA表達(dá)明顯增加，有顯著性差異(P＜0．05)，而蛋白濃度明顯下降，有顯著性差異(P＜0.05)。

4、 3．與再灌注120min組相比，再灌注180min組MMP-9mRNA表達(dá)和蛋白濃度無(wú)明顯增加；TIMP-1mRNA表達(dá)和蛋白濃度增加。 結(jié)論: 1．在肺缺血—再灌注損傷早期，MMP-9表達(dá)升高，并隨缺血—再灌注時(shí)間延長(zhǎng)而增加，說(shuō)明MMP-9是肺缺血再灌注損傷形成過(guò)程中重要的炎性因子；MMP-9/TIMP-1比值升高，并隨缺血—再灌注時(shí)間延長(zhǎng)而增加，兩者比值失衡是產(chǎn)生缺血—再灌注相關(guān)性肺損傷病理生理變化的一個(gè)重要