壓力負荷性心肌肥厚心室重塑和逆向重塑中信號傳導通路的研究.pdf

1、概述： 心肌肥厚是心臟在負荷增加時的一種常見而重要的適應性反應，可發(fā)生于高血壓、瓣膜病、心肌梗死等多種心血管疾病，流行病學調查揭示心肌肥厚是缺血性心臟病、心律失常和猝死的獨立危險因素。心肌肥厚后心室重塑是心力衰竭發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。心室重塑是一系列復雜的分子和細胞機制導致的心肌結構、功能和表型的改變。這些改變包括心肌重量和體積的增加，以及心室形狀的改變。近年的研究發(fā)現(xiàn)絲分裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族和核轉錄因子(NF-κB)

2、是心肌肥厚心室重塑過程中重要的中介通路。近來，左心輔助裝置(LVAD)作為晚期心力衰竭心臟移植前的過渡治療措施，越來越受重視。它能明顯提高病人的生存率和生活質量和降低晚期心力衰竭病人的死亡率。臨床研究發(fā)現(xiàn)，應用LVAD能改善心肌的結構和功能，并表現(xiàn)為心室“逆重塑”現(xiàn)象，但受臨床病例的限制和個體遺傳背景差異的影響，其機制研究受到限制。因此，在遺傳背景清晰的動物模型上制備模擬心室輔助卸負荷的現(xiàn)象，可以用于深入研究“逆重塑”現(xiàn)象的機制。

3、 目的： 建立模擬心室輔助的大鼠壓力負荷性心肌肥厚的卸負荷模型。研究MAPK家族和NF-κB在心室重塑和逆重塑中的作用。 方法： 1.Lewis大鼠行腹主動脈縮窄術制備心肌肥厚模型，術后6周用超聲心動圖評估肥厚模型。 2.分別把心肌肥厚的心臟(肥厚移植組)以及正常的心臟(對照移植組)稱重，用腹部異位移植法將稱重后的心臟移植到健康的同源Lewis大鼠腹部--將供心的升主動脈和主肺動脈吻合到受體的腹主動脈和

4、下腔靜脈。 3.分別對假手術(正常對照)組、心肌肥厚組觀察點的心臟以及腹部異位移植術后2周的肥厚移植組、對照移植組的供心進行稱重和取材，并進行病理學、組織學檢測。 4.分別對以上四組進行Akt/GSK3β，MAPK和NF-κβ信號通路以及它們上下游水平上的蛋白檢測方法(Westernblot)。包括：Akt、GSK3β總水平以及它們的磷酸化水平；MAPK激酶(ERK、p38、、JNK)以及它們相應下游特異轉錄因子(Elk

5、-1、ATF-2、c-jun)總水平以及它們的磷酸化水平；NFκB以及其抑制因子IkBα總水平以及它們的磷酸化水平。 結果： 1.動物模型的制備共制備腹主動脈縮窄模型90例，6周后符合心肌肥厚模型的有60例，成功率為67％。制備大鼠異位心臟移植模型58例，成功32例，成功率55％，冷缺血時間(30±4)min。 2.心臟重量結果肥厚組與假手術組比較，心臟總重量(HW)、左心室重量(LVW)顯著增加(p＜0.01)

6、；肥厚移植組與肥厚組比較，HW、LVW都顯著降低(p＜0.01)；正常卸負荷后，HW、LVW都顯著降低(p＜0.01)。 3.超聲評價結果肥厚組與假手術組比較，左心室前壁、后壁舒張厚度(LVAWd、LVPWd)明顯增厚(p＜0.05)；肥厚移植組與肥厚組比較LVAWd和LVPWd顯著降低(p＜0.01)。 4.組織學檢查結果肥厚組與假手術組比較，心肌細胞橫切面面積(CSA)顯著增加(p＜0.01)，心肌組織膠原分布顯著增

7、加(p＜0.01)；肥厚移植組與肥厚組比較，CSA顯著降低(p＜0.01)，而心肌組織膠原分布顯著增加(p＜0.01)。正常卸負荷后，CSA無明顯變化，而心肌組織膠原分布顯著增加(p＜0.01)。 5.蛋白檢測結果肥厚組中，ERK、Elk-1；p38、ATF-2；JNK、c-jun；Akt、GSK3β和NF-κB、IkBα的磷酸化明顯增加；而卸負荷后ERK、E1k-1、Akt、GSK3β和NF-κB、IkBα的磷酸化明顯降低，但